[發明專利]豬圓環病毒2型LAMP檢測引物組及試劑盒

在審

• 申請號: 202110665709.3
• 申請日: 2021-06-16
• 公開（公告）號: CN113337641A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 俞國華;楊小燕;戴愛玲;范克偉;劉建奎;黃翠琴;楊守深;尹會方;李曉華;王鑫;包銀莉
• 申請（專利權）人: 龍巖學院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 福州君誠知識產權代理有限公司 35211
• 代理人: 戴雨君

1.豬圓環病毒2型LAMP檢測引物組，其特征在于，該引物組包括6條引物，6條引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO. 1- SEQ ID NO.6所示，具體如下：

SEQ ID NO. 1（PCV2-F3）: 5′ -gctgtgagtaccttgttggag-3′

SEQ ID NO. 2（PCV2-B3）: 5′ -acaaccacttcttcaccatg-3′

SEQ ID NO. 3（PCV2-FIP）: 5′ -tgcattttcccgctcactttcttgcagagcagcaccctgtaac-3′

SEQ ID NO. 4（PCV2-BIP）: 5′ -atgtacacgtcattgtggggttctaggtggtttccagtatgtg-3′

SEQ ID NO. 5（PCV2-LF）: 5′ -agcccgcggaaatttctg-3′

SEQ ID NO. 6（PCV2-LB）: 5′ -gtgtggcaaaagcaaatgg-3′。

2.豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包含權利要求1所述的引物組。

3.根據權利要求2所述的豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒還包含Bst DNA聚合酶、dNTP、MgSO₄、Betaine、10Ｘ LAMP反應緩沖液、對反應結果起指示作用的指示劑或熒光染料。

4.根據權利要求3所述的豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述的對反應結果起指示作用的指示劑或熒光染料為HNB、鈣黃綠素、SYTO-9、SYBR Green或Eva Green。

5.根據權利要求4所述的豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的各組分及其含量如下：引物組 2 μL、8 Units /μL Bst DNA聚合酶 2.4 μL、25 mM dNTP 3μL、150 mM MgSO₄ 2 μL、5 M Betaine 10 μL、10Ｘ LAMP反應緩沖液 6 μL、3 mM HNB 2.4 μL、用去離子水補足到40 μL；

所述引物組中，各引物的摩爾濃度如下：PCV2-F3和PCV2-B3 的摩爾濃度均為20 μM，PCV2-FIP和PCV2-BIP的摩爾濃度均為160 μM，PCV2-LF和PCV2-LB的摩爾濃度均為80 μM。

6.根據權利要求2所述的豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含陽性對照質粒。

7.根據權利要求2所述的豬圓環病毒2型LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的反應條件為：61 ℃, 60 min。