[發明專利]一種針對中華絨螯蟹螺原體的特異性卵黃抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110665691.7
• 申請日: 2021-06-16
• 公開（公告）號: CN113527480B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 曹曉慧;劉鴻麗;顧偉;王文;孟慶國
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/02;A61K39/40;A61P31/04
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹翠珍

1.一種針對中華絨螯蟹螺原體的特異性卵黃抗體在制備中華絨螯蟹抵抗Spiroplasmaeriocheiris感染的飼料或藥物中的應用，其特征在于，所述抗體為抗S.eriocheiris的特異性IgY抗體，是由破碎后的螺原體注射進母雞體內，從雞蛋的卵黃中分離并純化得到的特異性抗體；

其制備方法包括以下步驟：

步驟1)將S.eriocheiris在R2培養基中培養24h后離心去上清，并用PBS重懸；步驟2)將經步驟1)重懸后的S.eriocheiris進行超聲破碎，并于20℃保存備用；步驟3)對母雞進行肌肉注射，注射1mL?200～400μg/mL經步驟2)破碎后的S.eriocheiris，生產特異性抗體IgY；

步驟4)對母雞進行3次注射，間隔2周，每天收集雞蛋，直至第九周，提取雞蛋卵黃，從卵黃中分離出IgY并純化，即得。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述飼料的制備方法包括以下步驟：

步驟A)從注射了400μg/mL的S.eriocheiris的雞卵黃中分離出IgY并純化；將分離純化的IgY以滴度為1:10000的比例進行稀釋，得到特異性IgY；

步驟B-1)將步驟A)制得的特異性IgY與商品飼料混合，混合質量比為1:4，并用蛋清作為粘合劑，即得。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述藥物的制備方法包括以下步驟：

步驟A)從注射了400μg/mL的S.eriocheiris的雞卵黃中分離出IgY并純化；將分離純化的IgY以滴度為1:10000的比例進行稀釋，得到特異性IgY；

步驟B-2)將步驟A)制得的特異性IgY與PBS按體積比為1:4進行混合，即得。