[發明專利]一種基于量子點熒光微球探針檢測氯霉素的方法

在審

• 申請號: 202110660260.1
• 申請日: 2021-06-15
• 公開（公告）號: CN113358861A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 湯軼偉;劉歡;高雪;劉秀英;張福源;于志鵬;呂長鑫
• 申請（專利權）人: 渤海大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 沈陽智龍專利事務所(普通合伙) 21115
• 代理人: 宋鐵軍

本發明涉及一種基于量子點熒光微球探針檢測氯霉素的方法，包括：(1)制備羧基化Mn?ZnS量子點熒光納米微球；(2)制備Mn?ZnS量子點納米微球?氯霉素熒光探針；(3)氯霉素熒光試紙條構建和檢測方法；(4)將步驟(2)的Mn?ZnS量子點?氯霉素熒光探針與待測樣品混合滴加于樣品墊上；(5)4?5min后根據試紙條上的熒光強度得到檢測結果。本發明提高了熒光探針的穩定性和靈敏度；一步合成的具有羧基和氨基修飾的Mn?ZnS量子點，提高了該量子點在水相溶劑中的分散性和穩定性，增加了Mn?ZnS量子點偶聯氯霉素抗體后熒光探針的靈敏度和穩定性，氯霉素熒光試紙條穩定性好，靈敏度高，商業應用價值好。

技術領域

本發明屬于材料、生物、生物檢測等交叉領域，特別涉及基于量子點熒光微球探針檢測氯霉素的方法。

背景技術

氯霉素(Chloramphenicol，CAP)是一種廣譜酰胺醇類抗生素類藥物，對炭疽桿菌、肺炎球菌、鏈球菌、李斯特菌、葡萄球菌以及衣原體、立克次氏體等病原微生物具有良好的抑制效果，可用于傷寒、腦膜炎和尿路感染等疾病的治療與預防。然而，CAP對人體具有較大的毒副作用，如抑制骨髓造血功能。此外，CAP理化性質極為穩定，不易降解，可通過食物鏈在人體內蓄積，從而對人體健康造成嚴重損害。

量子點(QDs)作為一種性能優良的熒光探針被廣泛的應用于生物標記、環境監測等各個領域中，深受科學家們的青睞。其中錳摻雜硫化鋅量子點，即保留了宿主ZnS原有的熒光特性，且摻雜的錳離子的發光壽命達ms級(約1.1ms)，可有效的避免背景熒光和散射光的干擾。

Mn-ZnS QDs量子產率高、分散性較好、穩定性高，然而該量子點因表面的疏水性質而不能直接應用到生物體系中，需要對其進行配體交換，再將制得水溶性量子點應用到生物體系中，步驟繁瑣。

發明內容

發明目的

本發明針對目前缺乏快速、簡便、靈敏度高、準確的檢測氯霉素的方法，提供一種基于量子點熒光微球探針檢測氯霉素的方法。該方法過程簡單、靈敏度高、快速、穩定性好，可廣泛推廣用于氯霉素檢測。

技術方案

一種基于量子點熒光微球探針檢測氯霉素的方法，其特征在于，步驟如下：

(1)制備羧基化Mn-ZnS量子點熒光納米微球；所述羧基化Mn-ZnS量子點熒光納米微球直徑為4±0.5nm；

所述羧基化Mn-ZnS量子點熒光納米微球，由以下步驟的方法制得：

將ZnSO₄、MnCl₂和谷胱甘肽溶于超純水中，用0.01mol/L的NaOH調節溶液pH值為11，通入氮氣條件下磁力攪拌30-40min后加入Na₂S溶液，繼續攪拌20-30min后，將溫度升至55-60℃時停止通入氮氣，繼續反應2-4小時；ZnSO₄、MnCl₂和谷胱甘肽的摩爾比為2.5：0.1：5；MnCl₂與Na₂S的摩爾比為1：25；MnCl₂與超純水的摩爾體積比為0.01：50(mmol：mL)；

反應結束后，加入等體積的乙醇使合成的量子點沉淀，在10000-12000rpm轉速下離心分離，去除液體，獲得產物，產物用去離子水洗滌大于等于5次去除未反應的原料，產物在低溫干燥后備用。

(2)利用步驟(1)制備的羧基化Mn-ZnS量子點熒光納米微球加入氯霉素單克隆抗體，制備Mn-ZnS量子點納米微球-氯霉素熒光探針；

所述制備的羧基化Mn-ZnS量子點熒光納米微球和氯霉素單克隆抗體，制備Mn-ZnS量子點納米微球-氯霉素熒光探針，由包括以下步驟的方法制得：