[發明專利]一種農桿菌介導轉化生菜組織培養方法

在審

• 申請號: 202110659231.3
• 申請日: 2021-06-15
• 公開（公告）號: CN113396821A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 武永軍;張翰卿;楊振超;梅延豪;劉齊
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學;楊凌凌宇現代農業研究院有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 李博

1.一種農桿菌介導轉化生菜組織培養方法，其特征在于，用農桿菌菌液侵染生菜無菌苗的外植體，將侵染后的生菜外植體相繼置于愈傷-發芽培養基、生根培養基上進行誘導，馴化移栽；所述愈傷-發芽培養基組成為：蔗糖25.0-35.0g/L+瓊脂7.0-8.0g/L+IAA 1.0-1.5mg/L+6-BA 0.5-0.9mg/L。

2.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述生菜無菌苗苗齡為5-8天。

3.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述生菜外植體為葉片。

4.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述農桿菌菌液OD₆₀₀＝0.3-0.5。

5.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述侵染時間為5-10分鐘。

6.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導條件為：溫度為25±3℃，光照周期為16L/8D，光照強度為200-300umol·m^-2·s^-1。

7.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導至長出2cm以上芽苗時轉移至生根培養基培養。

8.根據權利要求1或7所述的組織培養方法，其特征在于，所述生根培養基組成為：蔗糖25.0-35.0g/L+瓊脂7.0-8.0g/L。

9.根據權利要求1或7所述的組織培養方法，其特征在于，所述生根培養條件為：溫度為25±2℃，光照周期為16L/8D，光照強度為200-300umol·m^-2·s^-1。

10.根據權利要求1所述的組織培養方法，其特征在于，所述馴化移栽的基質為體積比為3-5:1的土和蛭石。