[發明專利]一種基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法

在審

• 申請號: 202110652953.6
• 申請日: 2021-06-11
• 公開（公告）號: CN113413471A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 王斌杰;陳天逸;汪安利;吳元釗;姚偉宣;王繼業;許中石
• 申請（專利權）人: 浙江警察學院
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 杭州知閑專利代理事務所(特殊普通合伙) 33315
• 代理人: 張勛斌

1.一種基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)配制莨菪類藥物溶液；

(2)采用所述的莨菪類藥物溶液對斑馬魚胚胎、斑馬魚幼魚和斑馬魚成魚進行處理，獲得毒性反應結果；

所述毒性反應結果包括斑馬魚幼魚胚胎發育毒性結果，斑馬魚幼魚行為學毒性結果和斑馬魚成魚行為學毒性結果；

(3)根據所述毒性反應結果得到莨菪類藥物的毒性數據。

2.根據權利要求1所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的莨菪類藥物為：(-)莨菪堿、阿托品、東莨菪堿、(-)東莨菪堿氫溴酸鹽、消旋山莨菪堿、氫溴酸樟柳堿、α-托品醇和莨菪亭中的一種或者多種。

3.根據權利要求1所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述斑馬魚幼魚胚胎發育毒性結果的獲取方法如下：

在顯微鏡下觀察記錄各實驗組斑馬魚心臟、腦部、耳、下頜、眼、肝臟、腸道、軀干/尾/脊索、肌肉/體節、鰭、體長、身體著色、循環系統、身體水腫和出血等毒性反應情況，統計各實驗組的毒性發生率，并對典型毒性器官進行拍照。

4.根據權利要求1所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述斑馬魚幼魚行為學毒性結果的獲取方法如下：

采集斑馬魚幼魚的自發運動情況，在全暗環境下和明暗交替環境下進行。

5.根據權利要求4所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，DanioVision高通量魚類行為跟蹤系統中，采用Ethovision XT10.0軟件追蹤采集40min內斑馬魚幼魚的自發運動情況。

6.根據權利要求4所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的明暗交替環境下具體為：5min全亮環境，然后5min全暗環境，重復循環2次。

7.根據權利要求4所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的自發運動情況包括游動軌跡、游動平均距離、游動最大速度、最大加速度、形態變化、死亡特征點。

8.根據權利要求1所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的斑馬魚成魚行為學毒性結果的獲取方法如下：在全亮環境下采集斑馬魚成魚的自發運動情況。

9.根據權利要求8所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(2)中，系統拍攝自發運動20min，采用Ethovision XT10.0軟件追蹤采集20min內斑馬魚成魚的自發運動情況；

步驟(2)中，所述的自發運動情況包括游動軌跡、游動平均距離、游動最大速度、最大加速度、形態變化、死亡特征點。

10.根據權利要求1所述的基于斑馬魚模型對莨菪類藥物進行毒性評價的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的莨菪類藥物的毒性數據由斑馬魚幼魚胚胎發育毒性結果、斑馬魚幼魚行為學毒性結果和斑馬魚成魚行為學毒性結果綜合進行判斷。