[發(fā)明專利]一種生物膜的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110647054.7 | 申請日： | 2021-06-10 |
| 公開（公告）號： | CN113368313B | 公開（公告）日： | 2022-06-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 董群;任恒飛;胡夏練 | 申請（專利權(quán)）人： | 吾奇生物醫(yī)療科技（江蘇）有限公司 |
| 主分類號： | A61L31/00 | 分類號： | A61L31/00;A61L31/14 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 212009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物膜 制備 方法 及其 產(chǎn)品 應(yīng)用 | ||
1.一種生物膜的制備方法，其特征在于，所述生物膜的制備方法包括以下步驟：
(1)采用膠原酶抑制劑處理動物腔道組織；所述處理具體為：將動物腔道組織浸泡于質(zhì)量濃度為1-20wt％膠原酶抑制劑的水溶液中進(jìn)行處理，所述動物腔道組織和膠原酶抑制劑的水溶液的質(zhì)量比為1:(5-15)，所述浸泡的溫度為20-30℃，所述浸泡的時(shí)間為1-6h；
(2)去除占動物腔道組織總脂肪含量40-60％的膜層；所述去除采用機(jī)械切割設(shè)備切除，去除的膜層的總厚度為1-3mm；
步驟(2)中，所述去除的膜層為漿膜層和漿膜下層，得到的產(chǎn)物為肌肉層、粘膜下層和粘膜層；所述去除的膜層為漿膜層、漿膜下層和部分肌肉層，得到的產(chǎn)物為剩余的肌肉層、粘膜下層和粘膜層；
(3)采用第一酶溶液處理步驟(2)得到的產(chǎn)物；所述第一酶溶液包括胰蛋白酶溶液和/或1398蛋白酶溶液，所述第一酶溶液的濃度為0.1-5wt％，所述處理采用浸泡的方式進(jìn)行，所述浸泡的溫度為20-30℃，所述浸泡的時(shí)間為1-8h；
(4)采用堿溶液處理步驟(3)得到的產(chǎn)物；所述堿溶液的濃度為0.1-5mol/L，所述堿溶液中還包括1-5wt％的膠原酶抑制劑，所述處理采用浸泡的方式進(jìn)行，所述浸泡的溫度為4-25℃，所述浸泡的時(shí)間為1-4h；
(5)采用脫細(xì)胞溶液處理步驟(4)得到的產(chǎn)物；所述脫細(xì)胞溶液包括表面活性劑的水溶液，所述表面活性劑的水溶液的濃度為0.1-5wt％，所述脫細(xì)胞溶液中還包括1-5wt％的膠原酶抑制劑，所述處理采用浸泡的方式進(jìn)行，所述浸泡的溫度為15-25℃，所述浸泡的時(shí)間為5-24h；
(6)采用脫脂液溶液處理步驟(5)得到的產(chǎn)物；所述脫脂液溶液包括有機(jī)溶劑和/或去污劑的水溶液，所述去污劑的水溶液的濃度為0.1-5wt％，所述脫脂液溶液還包括1-5wt％的膠原酶抑制劑，所述處理采用浸泡的方式進(jìn)行，所述浸泡的溫度為10-25℃，所述浸泡的時(shí)間為1-24h；
(7)采用第二酶溶液處理步驟(6)得到的產(chǎn)物；所述第二酶溶液包括多糖酶溶液、核酸酶溶液和蛋白酶溶液的混合水溶液，所述第二酶溶液的濃度為0.1-10wt％，所述處理采用浸泡的方式進(jìn)行，所述浸泡的溫度為20-30℃，所述浸泡的時(shí)間為1-24h；
(8)采用超臨界二氧化碳清洗步驟(7)得到的產(chǎn)物；所述超臨界二氧化碳清洗的壓力為10-50MPa，所述超臨界二氧化碳清洗的溫度為31-50℃，所述超臨界二氧化碳清洗中CO2流量為1-10L/min，得到生物膜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述動物腔道組織包括依次層疊的漿膜層、漿膜下層、肌肉層、粘膜下層和粘膜層。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述動物腔道組織選自動物食道組織、動物胃組織、動物腸道組織、動物尿道組織或動物膀胱組織中的任意一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述膠原酶抑制劑包括乙酰半胱胺酸、依地酸二鈉、青霉胺、甲孕酮、枸櫞酸鈉、四環(huán)素或強(qiáng)力霉素中的任意一種或至少兩種的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，所述機(jī)械切割設(shè)備切除的方法具體工藝參數(shù)包括：電壓160-265V，功率1200-4000W，切割速率5-40mm/s，切割后材料表面粗糙度100μm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述去除為去除占動物腔道組織總脂肪含量44-52％的膜層。
7.據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，所述堿溶液包括氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、碳酸鈉溶液或氫氧化鈣溶液中的任意一種或至少兩種的組合。
8.據(jù)權(quán)利要求1所述的生物膜的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，所述膠原酶抑制劑包括乙酰半胱胺酸、依地酸二鈉、青霉胺、甲孕酮、枸櫞酸鈉、四環(huán)素或強(qiáng)力霉素中的任意一種或至少兩種的組合。
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