[發(fā)明專利]用于鑒別普通小麥-簇毛麥6VS.6AL易位系的引物對及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110640527.0
• 申請日: 2021-06-09
• 公開（公告）號: CN113136452A
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊學(xué)明;趙涵;郭江濤;姚金保;周淼平
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 楊文晰

本發(fā)明公開了一種鑒別普通小麥?簇毛麥6VS.6AL易位系的引物對及其應(yīng)用，該引物對核苷酸序列分別為SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示；以T6VS.6AL易位系衍生小麥材料的DNA為模板，該引物對為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測，若待測材料PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中有403bp、328bp大小的2個條帶，則為6VS.6AL純合易位材料；若待測材料PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中有403bp、328bp、297bp大小的3個條帶，則不是6VS.6AL純合易位材料；利用該分子標(biāo)記可以提高育種分離世代中普通小麥?簇毛麥6VS.6AL純合易位系的選擇效率，用于大規(guī)模分子標(biāo)記輔助選擇育種，加快育種進(jìn)程。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及小麥遺傳育種領(lǐng)域，特別是一種用于鑒別普通小麥-簇毛麥6VS.6AL易位系的分子標(biāo)記引物對及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

簇毛麥?zhǔn)切←湹慕墝俜N，具有許多重要的農(nóng)藝性狀，其對幾乎全部的白粉病生理小種表現(xiàn)高抗或免疫，高抗葉銹和稈銹病，對眼斑病、梭條花葉病及其病毒傳媒癭螨等多種病蟲害都具有抗性，并且還具有抗寒、耐旱、密穗多花等優(yōu)良性狀，已經(jīng)成為小麥改良的優(yōu)良基因資源。以硬粒小麥-簇毛麥雙二倍體為橋梁，Chen和Liu(Identification ofHaynaldiavillosachromosomes in alien wheat additions，Proc.of 1^st InterChromosome Engineering of Plant,1986.279-300)獲得了涉及簇毛麥各別染色體的異染色體系(添加或代換系)，并將抗白粉病基因定位到簇毛麥6V染色體上。

Chen等利用電離輻射方法獲得了首個小麥-簇毛麥易位系6VS/6AL，白粉病抗性基因Pm21被定位到6V染色體短臂上(Chen PD et al.,Development and molecularcytogenetic analysis of wheat-Haynaldia villosa 6VS/6AL translocation linesspecifying resistance to powdery mildew,Theor.Appl.Genet.,1995,91:1125-1128；齊莉莉等，小麥白粉病新抗源-基因Pm21，作物學(xué)報,1995,21(3)：257-262)。利用該易位系及衍生材料，相繼育成許多小麥品種，其中在中國南方麥區(qū)育成27個6VS.6AL易位系品種(系)，中間試驗(yàn)中35.8％的品系為6VS.6AL易位系(Wu N,et al.,Predominant wheat-alien chromosome translocations in newly developed wheat of China,MolecularBreeding,2021,41:30)。由于6VS.6AL易位系在育種中被廣泛應(yīng)用，開發(fā)易于鑒別6VS.6AL純合易位的分子標(biāo)記，可以提高選擇效率，加速育種進(jìn)程。

曹愛忠等利用NAU/xibao15標(biāo)記引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳，可以從普通小麥的6AS、6BS、6DS和簇毛麥的6VS上擴(kuò)增出大小不同的PCR條帶(Cao AZet al.,A sequene-specific PCR marker linked with Pm21 distinguisheschromosomes 6AS,6BS,6DS of Triticum aestivum and 6VS of Haynaldiavillosa,Plant Breeding,2006,125:201-205)。由于NAU/xibao15標(biāo)記引物PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中，6DS、6AS分別對應(yīng)987bp、984bp的條帶，兩者相差僅3bp，電泳時不易檢測，操作相對困難，且無法用瓊脂糖凝膠電泳檢測。因此，在以普通小麥-簇毛麥6VS.6AL易位系作為供體親本的雜交育種中，迫切需要檢測簡便的分子標(biāo)記，來快速準(zhǔn)確鑒別6VS.6AL純合易位材料，提高選擇效率。

發(fā)明內(nèi)容