[發(fā)明專利]用于鑒別普通小麥-簇毛麥6VS.6AL易位系的引物對(duì)及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110640527.0
• 申請(qǐng)日: 2021-06-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113136452A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊學(xué)明;趙涵;郭江濤;姚金保;周淼平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 楊文晰

1.用于鑒別普通小麥-簇毛麥6VS.6AL易位系的引物對(duì)，其核苷酸序列分別如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示。

2.如權(quán)利要求1所述的引物對(duì)在鑒別T6VS.6AL純合易位小麥中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，具體步驟如下：

以待測(cè)小麥DNA為模板，核苷酸序列分別如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物對(duì)為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)，若出現(xiàn)大小分別為403bp、328bp的2個(gè)條帶，則判定該小麥材料為6VS.6AL純合易位小麥。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增體系為：

濃度為40ng/μL的DNA模板1μL，濃度為10μM的引物I 1μL，濃度為10μM的引物II 1μL，2× Taq Plus Master Mix Ⅱ10 μL，ddH₂O 補(bǔ)足至20μL；

所述引物I核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述引物II 核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

PCR反應(yīng)循環(huán)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3min，94℃變性30s，62℃退火40s，72℃延伸70s，34個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述待測(cè)小麥?zhǔn)侵高z傳系譜中至少有一個(gè)親本為T6VS.6AL易位系的小麥。