[發(fā)明專利]液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測腎素活性過程中對影響ARR藥物同步檢測的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110637441.2
• 申請日: 2021-06-08
• 公開（公告）號: CN113533552B
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉鵬云;孔子青;馬金飛;袁小芬;劉華芬
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州凱萊譜精準(zhǔn)醫(yī)療檢測技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 杭州天昊專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33283
• 代理人: 向慶寧;曹小燕

本發(fā)明提供了一種液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測腎素活性過程中對影響ARR(血漿醛固酮與腎素活性比值)的治療藥物同步檢測的方法，在通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測血漿腎素活性的同時，實現(xiàn)對影響ARR數(shù)值的藥物的定性篩查，可用于協(xié)助分析判斷ARR為陰性、陽性、假陰性、或假陽性。在對樣本進(jìn)行蛋白沉淀的同時，實現(xiàn)對血管緊張素I和43種高血壓治療藥物的有效提取；利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的高通量、高特異性、高靈敏度的特性，對提取樣本進(jìn)行包括血管緊張素I以及43種高血壓治療藥物等多指標(biāo)的同步檢測；利用篩查藥物的MRM質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行藥物的初篩，并根據(jù)藥物的保留時間進(jìn)行復(fù)核。ARR檢測值聯(lián)合藥物篩查結(jié)果共同分析，在避免患者停止藥物治療的同時，有效辨別檢測的假陽性或假陰性結(jié)果，提高實際原發(fā)性醛固酮增多癥和臨床腎素活性檢測的準(zhǔn)確性，便于臨床推廣和應(yīng)用。

本申請主張中國在先申請,申請?zhí)?2021106145678，申請日2021年6月2日的優(yōu)先權(quán)；其所有的內(nèi)容作為本發(fā)明的一部分。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種原發(fā)性醛固酮增多癥的定性檢測方法，尤其涉及一種血漿醛固酮濃度(PAC)/血漿腎素活性(PRA)的比值A(chǔ)RR的檢測及判斷方法。

背景技術(shù)

原發(fā)性醛固酮增多癥(PA，簡稱原醛癥)是一種常見的內(nèi)分泌性高血壓，其特點是腎上腺皮質(zhì)自主分泌醛固酮，導(dǎo)致體內(nèi)潴鈉排鉀，血容量增多，腎素-血管緊張素系統(tǒng)活性受抑制，臨床主要表現(xiàn)為高血壓和低血鉀。

血漿醛固酮濃度(PAC)/血漿腎素活性(PRA)的比值A(chǔ)RR是篩查原發(fā)性醛固酮增多癥的最可靠方法。其中血漿腎素活性是衡量在腎素催化下，外周血中血管緊張素I產(chǎn)生效率的指數(shù)，在腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)(RAAS)所致高血壓的分型診斷中有重要意義。

2010年由中華醫(yī)學(xué)會內(nèi)分泌學(xué)分會牽頭，在全國11個省19個中心對1656例難治性高血壓患者進(jìn)行了原醛癥的篩查，報道其患病率為7.1％。李啟富教授團(tuán)隊發(fā)表的研究表明，原醛癥在新診斷高血壓中的發(fā)生率超過4.0％。在2020版《原發(fā)性醛固酮增多癥診斷治療的專家共識》中將ARR作為原醛癥首選篩查指標(biāo)，且認(rèn)為對高血壓特別是難治性高血壓及新診斷高血壓人群進(jìn)行原醛癥的篩查對臨床工作有著現(xiàn)實的指導(dǎo)意義，并推薦對所有新診斷的高血壓患者進(jìn)行原醛癥篩查。

在專家共識中進(jìn)一步指出，ARR數(shù)值會受到包括年齡、性別、飲食、服用藥物、體位、血鉀及肌酐等多種因素的影響，可能導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果，其中尤其需對使用的治療藥物進(jìn)行關(guān)注。共識要求，ARR的檢測須在停用對ARR數(shù)值影響較大的藥物至少四周時進(jìn)行，以避免假陽性或假陰性結(jié)果；需要特別注意的是ACE抑制劑(ACE-Is)、二氫吡啶鈣通道阻滯劑(CCBs)和血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑(ARBs)，可通過降低PAC和大幅升高PRA水平從而降低ARR，導(dǎo)致假陰性的檢測結(jié)果，需停用上述藥物至少2周再次進(jìn)行檢測。但由于原醛癥經(jīng)常會引起嚴(yán)重的高血壓，因此停藥對患者是有潛在危害的。

ARR測定包括血漿醛固酮(PAC)與血漿腎素活性(PRA)，目前普遍采用放射免疫法測定PRA，通過單位時間單位體積內(nèi)血管緊張素原轉(zhuǎn)變?yōu)檠芫o張素Ⅰ的速率間接反映血漿中的腎素活性水平。大多數(shù)中心亦采用放射免疫法測定血醛固酮(PAC)。免疫法測定腎素活性和醛固酮含量，存在免疫法固有的特異性差、存在交叉偶聯(lián)反應(yīng)等缺陷，而且無法實現(xiàn)對影響ARR數(shù)值的高血壓治療藥物的篩查，患者需要面臨停藥檢測的風(fēng)險。

因此急需找到一種更簡單便利的ARR的檢測方法，既能避免患者停止藥物治療，又能有效減低原發(fā)性醛固酮增多癥檢測的假陽性或假陰性結(jié)果，提高臨床實際ARR和腎素活性檢測的準(zhǔn)確性。

發(fā)明內(nèi)容