[發(fā)明專(zhuān)利]一種鑒別棘頭梅童魚(yú)南北群體通用的遺傳性別分子標(biāo)記、引物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110636077.8
• 申請(qǐng)日: 2021-06-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113215280B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡明夷;陳俊男;周莉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廈門(mén)市精誠(chéng)新創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35218
• 代理人: 秦華

1.一種鑒別棘頭梅童魚(yú)南北群體通用的遺傳性別分子標(biāo)記，其特征在于，所述分子標(biāo)記的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，具有缺失SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的個(gè)體，為遺傳雄性棘頭梅童魚(yú)。

2.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述遺傳性別分子標(biāo)記的引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

3.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求2所述引物。

4.一種鑒定棘頭梅童魚(yú)南北群體性別的分子標(biāo)記的方法，其特征在于，使用權(quán)利要求2所述的引物或權(quán)利要求3試劑盒中的引物，對(duì)待測(cè)的南北群體棘頭梅童魚(yú)進(jìn)行權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記的檢測(cè)，以確定所述待測(cè)南北群體棘頭梅童魚(yú)的遺傳性別。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，方法為，

獲取待檢測(cè)棘頭梅童魚(yú)的DNA；

使用權(quán)利要求2所述的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

電泳檢測(cè)并判斷。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的體系為：當(dāng)反應(yīng)總體積為20 μL時(shí)，具體反應(yīng)體系為ddH₂O 13.4 μL;10×Buffer 2 μL；2.5 mM的dNTP 1.6 μL；10 mM的上游引物0.4 μL ；10 mM的下游引物0.4 μL；Taq酶0.2 μL；30 ng/μL的DNA模板 2μL。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的程序?yàn)椋?4℃ 預(yù)變性5 min；94℃ 變性30 s，63℃ 退火30 s，72℃延伸30 s；30個(gè)循環(huán)后， 接著72℃ 延伸10 min。

8.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述判斷為：如果PCR只出現(xiàn)一條帶，且為310bp，其為雌性棘頭梅童魚(yú)；如果PCR出現(xiàn)兩條帶，一條帶為310 bp，另一條帶為282 bp，其為雄性棘頭梅童魚(yú)。

9.一種權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記或權(quán)利要求2所述引物或權(quán)利要求3所述試劑盒在棘頭梅童魚(yú)育種中的用途。