[發明專利]一種鑒別棘頭梅童魚南北群體通用的遺傳性別分子標記、引物及其應用

有效

• 申請號: 202110636077.8
• 申請日: 2021-06-08
• 公開（公告）號: CN113215280B
• 公開（公告）日: 2022-09-23
• 發明（設計）人: 蔡明夷;陳俊男;周莉
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 秦華

1.一種鑒別棘頭梅童魚南北群體通用的遺傳性別分子標記，其特征在于，所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，具有缺失SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的個體，為遺傳雄性棘頭梅童魚。

2.一種用于檢測權利要求1所述遺傳性別分子標記的引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

3.一種用于檢測權利要求1所述分子標記的試劑盒，其特征在于，包括權利要求2所述引物。

4.一種鑒定棘頭梅童魚南北群體性別的分子標記的方法，其特征在于，使用權利要求2所述的引物或權利要求3試劑盒中的引物，對待測的南北群體棘頭梅童魚進行權利要求1所述分子標記的檢測，以確定所述待測南北群體棘頭梅童魚的遺傳性別。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，方法為，

獲取待檢測棘頭梅童魚的DNA；

使用權利要求2所述的引物進行PCR擴增；

電泳檢測并判斷。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的體系為：當反應總體積為20 μL時，具體反應體系為ddH₂O 13.4 μL;10×Buffer 2 μL；2.5 mM的dNTP 1.6 μL；10 mM的上游引物0.4 μL ；10 mM的下游引物0.4 μL；Taq酶0.2 μL；30 ng/μL的DNA模板 2μL。

7.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的程序為：94℃ 預變性5 min；94℃ 變性30 s，63℃ 退火30 s，72℃延伸30 s；30個循環后， 接著72℃ 延伸10 min。

8.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述判斷為：如果PCR只出現一條帶，且為310bp，其為雌性棘頭梅童魚；如果PCR出現兩條帶，一條帶為310 bp，另一條帶為282 bp，其為雄性棘頭梅童魚。

9.一種權利要求1所述分子標記或權利要求2所述引物或權利要求3所述試劑盒在棘頭梅童魚育種中的用途。