[發明專利]一種CAR-CXCL12 T淋巴細胞及其制備方法在審
| 申請號： | 202110633426.0 | 申請日： | 2021-06-07 |
| 公開（公告）號： | CN113322236A | 公開（公告）日： | 2021-08-31 |
| 發明（設計）人： | 李強 | 申請（專利權）人： | 李強 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 新余市渝星知識產權代理事務所(普通合伙) 36124 | 代理人： | 廖平 |
| 地址： | 433134 湖北省*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 car cxcl12 淋巴細胞 及其 制備 方法 | ||
1.一種CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞，其特征在于，所述T細胞的表達靶向CXCR4的嵌合抗原受體為CAR-CXCL12，其基因序列見SEQ ID NO.1。
2.一種如權利要求1所述CAR-CXCL12修飾的淋巴T細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(A)提供一待改造的T淋巴細胞；和
(B)對所述的免疫細胞進行改造，從而使得所述的免疫細胞表達靶向CXCR4的嵌合抗原受體CAR-CXCL12，從而獲得CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
S1.準備待改造的T淋巴細胞：將新鮮血液稀釋后加入Ficoll，離心，吸取中間白膜層，洗滌，培養，得到待改造的T淋巴細胞；
S2.制備CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞：向改造的T淋巴細胞中加入CXCL12二代CAR的慢病毒和感染試劑，培養48h后加入新鮮培養基，繼續培養5天，得到CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞。
4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述洗滌方法為加入生理鹽水后混勻，離心，分離，重復2-3次。
5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述培養條件為37℃，5％CO2培養箱培養48h。
6.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述感染試劑為TRANS B。
7.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述培養條件為37℃，5％CO2培養箱培養。
8.一種制劑，其特征在于，所述制劑含有權利要求1所述的CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
9.如權利要求1所述的CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞的用途，其特征在于，用于制備選擇性殺傷腫瘤的藥物或制劑。
10.一種選擇性殺傷腫瘤的方法，其特征在于，包括：給需要治療的對象施用安全有效量的權利要求1所述的CAR-CXCL12修飾的T淋巴細胞、或權利要求8所述的制劑。
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