[發明專利]一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110626443.1
• 申請日: 2021-06-04
• 公開（公告）號: CN113352654B
• 公開（公告）日: 2022-05-20
• 發明（設計）人: 趙遠錦;易可馨;池俊杰;王月桐;商珞然
• 申請（專利權）人: 南京鼓樓醫院
• 主分類號: B29C70/58
• 分類號: B29C70/58;B29C33/38;B29C33/40;G01N21/64;A61B5/00;A61B5/145
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司 32252
• 代理人: 劉佳慧

1.一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

包括以下步驟：

步驟一、制備PDMS針狀孔微針陣列模板：將PDMS和固化劑配制成待固化PDMS，然后將該待固化PDMS轉移到ETPTA微針陣列陽模板表面；將前述體系抽真空處理，然后在70-80℃下加熱固化；冷卻后進行剝離處理，制得PDMS針狀孔微針陣列模板；

步驟二、制備造孔材料：將造孔劑表面包覆上一層生物粘合劑，制得造孔材料；

步驟三、制備含造孔材料的微針貼片：將微針原材料溶液和造孔材料混合配制成造孔液；然后將所述造孔液和微針原材料溶液分步依次灌注入PDMS針狀孔微針陣列模板中，待造孔液和微針原材料溶液固化后進行剝離處理，得到含造孔材料的微針貼片；

所述微針原材料溶液為乙氧基化三羥甲基丙烷三丙烯酸酯；

步驟四、制備多孔微針貼片：將含造孔材料的微針貼片與造孔刻蝕劑進行反應，造成孔洞，制得多孔微針貼片；

其中，造孔劑為可被造孔刻蝕劑腐蝕的微球顆粒；

步驟五、制備適配體分子探針修飾的多孔微針貼片：將多孔微針貼片和適配體分子探針在緩沖液中反應，利用生物粘合劑的粘性將適配體分子探針連接在多孔微針貼片的孔壁上，然后用封閉液進行封閉處理，得到適配體分子探針修飾的多孔微針貼片；

所述適配體分子探針修飾的多孔微針貼片在內毒素檢測中的應用，所述適配體分子探針為DNA單鏈小分子。

2.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟二中，所述造孔劑為硅酸鹽微球或玻璃微珠，直徑為20-50μm；

步驟四中，所述造孔刻蝕劑為氫氟酸溶液，體積百分數為20 %。

3.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟二中的具體方法為：將造孔劑分散在緩沖液中，攪拌，然后添加生物粘合劑或生物粘合劑前體，繼續攪拌，在造孔劑表面包覆一層生物粘合劑，反應結束后固液分離，即得造孔材料。

4.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟二中，所述生物粘合劑為聚多巴胺、羧基化氧化石墨烯中的一種。

5.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟三中，所述微針原材料溶液和造孔液通過真空處理的方式灌注入PDMS針狀孔微針陣列模板。

6.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟三中，所述微針原材料溶液和造孔液的固化方法為在造孔液和微針原材料溶液中均混入2-羥基-2-甲基苯丙酮，體積百分比為1%，紫外光照射，使其聚合固化。

7.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，步驟五中，所述封閉液為牛血清白蛋白，質量體積百分數為2%、5%其中的一種。

8.根據權利要求1所述的一種適配體分子探針修飾的多孔微針貼片的制備方法，其特征在于：

其中，所述微針貼片的微針為圓錐形、三棱錐形或四棱錐形；

當微針為圓錐形時，其底部半徑為300-500 μm，微針高度為500-1000 μm；

當微針為四棱錐形時，其底部邊長為300-500 μm，微針高度為500-1000 μm。