[發(fā)明專利]一種利用組織培養(yǎng)技術繁殖芍藥的方法

有效

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• 申請日: 2021-06-04
• 公開（公告）號: CN113133410B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設計）人: 李艷敏;張和臣;薛嫻;王慧娟;高杰;符真珠;王利民;王二強;高凱;袁欣;蔣卉
• 申請（專利權）人: 河南省農(nóng)業(yè)科學院園藝研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 楊海霞

本發(fā)明涉及一種利用組織培養(yǎng)技術繁殖芍藥的方法，其以芍藥地下鱗芽為外植體來源，清洗、滅菌后作為組培用外植體；然后在外植體萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)20?40 d，培育莖尖萌發(fā)成苗；將莖尖萌發(fā)形成的組培苗，轉入潛伏芽形成培養(yǎng)基中培養(yǎng)50?100 d，使葉柄基部、莖基部的潛伏芽形成并長大；將得到的潛伏芽轉入芽盤誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)30?60 d，誘導形成芽盤。該方法針對芍藥的生長繁殖特性而設計，簡便易行，能夠獲得大量芽盤，芽盤上端的芽可以正常萌發(fā)，芽盤下端能形成不定根，生根率高，為芍藥組培苗移栽提供健壯生根苗。

技術領域

本發(fā)明屬于植物的組培快繁方法技術領域，特別涉及一種利用組培技術誘導組培苗產(chǎn)生芽盤結構繁殖芍藥的方法。

背景技術

芍藥是芍藥科芍藥屬多年生草本植物，為我國傳統(tǒng)名花，至今有3000多年的栽培歷史，與牡丹并稱為“花王”、“花相”。芍藥花大色艷，花型多變，不僅可以園林和庭園栽培，還是高檔切花。芍藥根可藥用，花可食用，種子含油率高，富含亞麻酸、亞油酸和油酸，可作食用油，應用前景廣闊。

目前，芍藥主要采用分株的方式繁殖，但僅在秋季進行，受時間限制，繁殖效率低。已經(jīng)有芍藥不同品種的組培技術文獻，但多數(shù)研究集中在外植體的選擇和培養(yǎng)基配方等內(nèi)容，并且都是通過誘導不定芽形成的方式進行增殖，存在褐化、玻璃化嚴重等現(xiàn)象，?；矢哌_40.91%（鄭黎文等，芍藥‘種生粉’離體芽培養(yǎng)及玻璃化苗復壯研究，林業(yè)科學研究，2011,24（3）:379-384）；組培苗生長勢弱，生根率最高為28.15%，并且苗基部形成了大量愈傷組織，愈傷率高達44.4%（吳紅娟等，觀賞芍藥‘大富貴’叢生芽誘導及生根技術，東北林業(yè)大學學報，2011（9）：20-22），嚴重影響了芍藥試管苗的移栽，成為芍藥組培快繁的技術瓶頸，制約了芍藥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展進程。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術缺陷，提供一種利用組織培養(yǎng)技術繁殖芍藥的方法，該方法針對芍藥的生長繁殖特性而設計，簡便易行，能夠獲得大量芽盤，芽盤上端形成休眠芽，在合適的培養(yǎng)條件下，休眠芽可以正常萌發(fā)，芽盤下端能形成不定根，生根率高，為芍藥組培苗移栽提供健壯生根苗。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種芍藥組培用培養(yǎng)基組合物，該組合物在芍藥組培過程中用于將外植體誘導形成芽盤結構；該組合物包括：外植體萌發(fā)培養(yǎng)基、潛伏芽形成培養(yǎng)基和芽盤誘導培養(yǎng)基；具體而言：

所述外植體萌發(fā)培養(yǎng)基組成為：1/2MS培養(yǎng)基+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L+6-BA 0.1～2.0mg/L+ 0IBA ≤1.0mg/L；

所述潛伏芽形成培養(yǎng)基組成為：WPM培養(yǎng)基+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L+06-BA≤1mg/L+0≤NAA ≤0.1 mg/L；

芽盤誘導培養(yǎng)基組成為：WPM培養(yǎng)基+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L+06-BA≤0.8 mg/L+0≤椰子汁≤200 ml/L。

一種利用組織培養(yǎng)技術繁殖芍藥的方法，其包括如下步驟：

1）芍藥外植體滅菌：

以芍藥地下鱗芽為外植體來源，清洗、滅菌后作為組培用外植體；

2）芍藥外植體萌發(fā)：

將步驟1）中外植體，在外植體萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)20-40 d，培育莖尖萌發(fā)成苗；

3）芍藥組培苗潛伏芽形成：

將莖尖萌發(fā)形成的組培苗，轉入潛伏芽形成培養(yǎng)基中培養(yǎng)50-100 d，使葉柄基部、莖基部的潛伏芽形成并長大；

4）芍藥芽盤誘導：

將得到的潛伏芽轉入芽盤誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)30-60 d，誘導形成芽盤。