[發(fā)明專利]產(chǎn)西柏三烯一醇的釀酒酵母的構(gòu)建方法及應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110621179.2 | 申請日: | 2021-06-03 |
| 公開(公告)號: | CN113388536A | 公開(公告)日: | 2021-09-14 |
| 發(fā)明(設計)人: | 陳獻忠;楊海泉;張坤杰;劉萬隆;董田田;沈微;夏媛媛;陳磊;曹鈺 | 申請(專利權(quán))人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N1/19 | 分類號: | C12N1/19;C12N9/88;C12N9/10;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/81;C12P7/02;C12R1/865 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇鈺瑩 |
| 地址: | 214000 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 產(chǎn)西柏三烯一醇 釀酒 酵母 構(gòu)建 方法 應用 | ||
1.一株產(chǎn)西柏三烯一醇的釀酒酵母,其特征在于,表達了西柏三烯醇合酶、香葉基香葉基焦磷酸合酶和法尼基焦磷酸合成酶;所述西柏三烯醇合酶含有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;所述香葉基香葉基焦磷酸合酶含有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;所述法尼基焦磷酸合成酶含有SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的釀酒酵母,其特征在于,以釀酒酵母W303-1A或釀酒酵母BY4741為宿主。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的釀酒酵母,其特征在于,所述釀酒酵母含有連接了西柏三烯醇合酶基因、香葉基香葉基焦磷酸合酶基因和法尼基焦磷酸合成酶基因的重組質(zhì)粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的釀酒酵母,其特征在于,所述重組質(zhì)粒以質(zhì)粒pY26TEF-GPD或pYX212為質(zhì)粒骨架。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一所述的釀酒酵母,其特征在于,所述法尼基焦磷酸合成酶通過啟動子PGAP過表達。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的釀酒酵母,其特征在于,所述其基因序列如SEQ ID NO.7。
7.權(quán)利要求1~6任一所述的釀酒酵母在生產(chǎn)西柏三烯一醇中的應用。
8.一種生產(chǎn)西柏三烯一醇的方法,其特征在于,將權(quán)利要求1~6任一所述的釀酒酵母接種至培養(yǎng)基中,于25-35℃培養(yǎng)1-5d。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,將釀酒酵母接種至YPD培養(yǎng)基中,于25-35℃、100-300rpm培養(yǎng)1-5d。
10.權(quán)利要求1~6任一所述的釀酒酵母或權(quán)利要求8~9任一所述的方法在農(nóng)業(yè)、煙草領域生產(chǎn)含西柏三烯一醇的產(chǎn)品方面的應用。
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