[發(fā)明專利]一種用于制備L-塔格糖的雙酶催化體系及應(yīng)用

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• 申請日: 2021-06-03
• 公開（公告）號: CN113337484A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇文彬;范小蔓;黃佳瀅;李學(xué)勇;張業(yè)旺
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;C12N9/02;C12P19/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于制備L-塔格糖的雙酶催化體系，其特征在于，所述雙催化體系包含NADH氧化酶、半乳糖醇脫氫酶和NAD⁺輔酶因子，其中，體系中NADH氧化酶、半乳糖醇脫氫酶和NAD⁺輔酶因子用量比為1-1.5 U/mL：2-2.25 U/mL：1~3 mM。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于制備L-塔格糖的雙酶催化體系，其特征在于，所述NADH氧化酶為變形鏈球菌的產(chǎn)水型NADH氧化酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于制備L-塔格糖的雙酶催化體系，其特征在于，所述半乳糖醇脫氫酶為球形紅球菌的半乳糖醇脫氫酶。

4.權(quán)利要求1~3中任一項所述用于制備L-塔格糖的雙酶催化體系在生物催化合成L-塔格糖中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，包括：

將D-半乳糖醇用Tris-HCl緩沖液溶解，然后加入半乳糖醇脫氫酶液和NADH氧化酶液，然后加入NAD⁺輔酶因子，得到反應(yīng)體系，磁力攪拌反應(yīng)，得到L-塔格糖。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述Tris-HCl緩沖液的pH值為9.0。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，D-半乳糖醇用Tris-HCl緩沖液溶解后濃度為100 mM。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述半乳糖醇脫氫酶在反應(yīng)體系中的終濃度為1~1.5 U/mL，NADH氧化酶酶液在反應(yīng)體系中的終濃度為2~2.25 U/mL。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述NAD⁺輔酶因子的添加量為1~3 mM。

10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述磁力攪拌反應(yīng)的條件為：在pH值為7.0-9.0的條件下，在5-50℃反應(yīng)12-26h。