[發明專利]檢測對蝦VPAHPND急性菌株和亞急性菌株的方法在審
| 申請號： | 202110613088.4 | 申請日： | 2021-06-02 |
| 公開（公告）號： | CN113337626A | 公開（公告）日： | 2021-09-03 |
| 發明（設計）人： | 沈輝;蔣葛;喬毅;萬夕和;成婕;范賢平;劉學實;李浩瀾;竇彥斌;王李寶;黎慧;史文軍 | 申請（專利權）人： | 江蘇省海洋水產研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/63 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 張換君 |
| 地址： | 226000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 對蝦 vpahpnd 急性 菌株 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種檢測VPAHPND急性菌株和亞急性菌株的引物，其特征在于，包括用于檢測VPAHPND毒力因子PirA和PirB的引物對，所述引物對為：
PirA-F：5’-CGTGGGGAGCTTACCATTCA-3’；
PirA-R：5’-AAACCACGACTAGCGCCATT-3’；
PirB-F：5’-AAACTTCGGTTATGCTGCGG-3；
PirB-R：5’-CACCAACTACGAGCACC CAT-3’。
2.利用權利要求1所述的引物檢測VPAHPND急性菌株和亞急性菌株的方法，其特征在于，包括以煮沸后的菌液上清為模板DNA，利用多重PCR方法對VPAHPND毒力因子PirA和PirB進行擴增的步驟。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，擴增反應體系為25μL，包括10×PCR緩沖液2.5μL，dNTPs mixture 2μL，4種引物各0.5μL，模板DNA 1μL，rTaq酶0.20μL。
4.如權利要求2所述的方法，其特征在于，擴增反應條件：94℃5min；94℃30s，60℃30s，72℃40s，30個循環；72℃5min。
5.一種檢測VPAHPND急性菌株和亞急性菌株的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的引物。
6.一種如權利要求5所述的試劑盒在檢測VPAHPND急性菌株和亞急性菌株中的應用。
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