[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條及其制備方法和檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110611352.0
• 申請(qǐng)日: 2021-06-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113552360A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-10-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邱靜;寧香雪;賈琪;錢(qián)永忠
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/58
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/58;G01N33/558
• 代理公司: 北京超凡宏宇專(zhuān)利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 黃燕

本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條及其制備方法和檢測(cè)方法，涉及分子檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。通過(guò)兩條檢測(cè)線可同時(shí)檢測(cè)金剛烷胺與恩諾沙星兩種物質(zhì)，而無(wú)需任何儀器設(shè)備，操作簡(jiǎn)便快捷，手動(dòng)操作同時(shí)通過(guò)肉眼即可讀取結(jié)果，大大提高了實(shí)地現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)金剛烷胺與恩諾沙星殘留超標(biāo)的效率，在恩諾沙星和金剛烷胺藥物的快速免疫檢測(cè)應(yīng)用中將有廣闊的前景，同時(shí)上述兩用試紙條的提出也為市場(chǎng)監(jiān)測(cè)提供了強(qiáng)力保障。該試紙條具有特異性好，穩(wěn)定性好的優(yōu)勢(shì)。此外，還提供了一種檢測(cè)恩諾沙星和/或金剛烷胺的方法，該檢測(cè)方法可以滿(mǎn)足恩諾沙星和金剛烷胺的快速精準(zhǔn)檢出。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條及其制備方法和檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

恩諾沙星是第三代氟喹諾酮類(lèi)廣譜抗菌藥，由于堿性分子的逐漸變化，恩諾沙星的抗菌性能大大提高，藥代動(dòng)力學(xué)得到改善，而不良反應(yīng)的可能性降低，作為抗菌藥物廣泛應(yīng)用于細(xì)菌和支原體感染等。恩諾沙星能夠靶向抑制細(xì)菌促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶的合成，從而對(duì)細(xì)菌的復(fù)制和生長(zhǎng)階段造成影響。根據(jù)國(guó)家規(guī)定恩諾沙星最高殘留限量為0.1mg/mL。大劑量的恩諾沙星攝入會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物急性中毒；長(zhǎng)期低劑量攝入也會(huì)使動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生抗藥性，而不科學(xué)濫用還會(huì)引發(fā)藥物殘留，經(jīng)過(guò)食物鏈從而對(duì)人類(lèi)健康產(chǎn)生很大危害。

恩諾沙星的化學(xué)名為1-環(huán)丙基-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-6-氟-1,4-二氫-4-氧代-3-喹啉羧酸，屬于由萘啶酸核心結(jié)構(gòu)衍生而成的6-氟喹諾酮或4-喹諾酮類(lèi)化合物。CAS登記號(hào)為93106-60-6，分子式為C₁₉H₂₂FN₃O₃，相對(duì)分子質(zhì)量為359.39，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

金剛烷胺是一種三環(huán)胺，自20世紀(jì)60年代起首次作為抗病毒藥物使用，其通過(guò)增加多巴胺的釋放、阻斷再攝取、增加突觸后多巴胺受體或改變其構(gòu)象來(lái)調(diào)節(jié)多巴胺活性，同時(shí)也是n-甲基-d-天冬氨酸(NMDA)受體，作為神經(jīng)藥物及止痛鎮(zhèn)痛劑廣泛應(yīng)用于人類(lèi)及動(dòng)物治療等多種場(chǎng)合(例如作為獸藥)。分子式為C₁₀H₁₇N，相對(duì)分子量為151.249，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下所示：

近年來(lái)動(dòng)物源性食品中金剛烷胺與恩諾沙星檢測(cè)超標(biāo)事件時(shí)有發(fā)生，根據(jù)2020年市場(chǎng)監(jiān)管總局發(fā)布的不合格產(chǎn)品情況通報(bào)，在流通量較大的禽類(lèi)產(chǎn)品中，金剛烷胺與恩諾沙星檢出頻率尤為突出。目前國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的文獻(xiàn)中，金剛烷胺和恩諾沙星檢測(cè)方法主要有儀器檢測(cè)法、熒光分光光度法和免疫分析方法等，但這些方法或需要昂貴的儀器設(shè)備，檢測(cè)費(fèi)用高，或操作時(shí)間長(zhǎng)，操作技術(shù)要求高且不能用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條及其制備方法和檢測(cè)方法以解決上述技術(shù)問(wèn)題，從而建立一種快速、可靠、低成本的能夠同時(shí)檢測(cè)金剛烷胺與恩諾沙星的分析方法。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明提供了一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條，試紙條包括底板，在底板的表面沿層析方向依次鋪設(shè)有樣品墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，且樣品墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次固定連接，硝酸纖維素膜上包被有兩條檢測(cè)線和質(zhì)控線，兩條檢測(cè)線是指包被有金剛烷胺抗原的檢測(cè)線和包被有恩諾沙星抗原的檢測(cè)線，質(zhì)控線是指包被有X抗鼠IgG的質(zhì)控線；膠體金結(jié)合墊上設(shè)有金剛烷胺抗體、恩諾沙星抗體和膠體金的偶聯(lián)物；X為羊或兔。

本發(fā)明還提供了一種檢測(cè)恩諾沙星和金剛烷胺的兩用試紙條的制備方法，其包括如下步驟：

在底板上，將樣品墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊拼接為試紙條；

硝酸纖維素膜上包被有兩條檢測(cè)線和質(zhì)控線。