[發(fā)明專利]一種玉米多堆柄銹菌致病型鑒別寄主體系構(gòu)建和鑒定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110610493.0
• 申請日: 2021-06-01
• 公開（公告）號: CN114032279A
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬占鴻;黃莉群;孫秋玉
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 北京安博達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11271
• 代理人: 徐國文

本發(fā)明提供了一種玉米多堆柄銹菌致病型鑒別寄主體系構(gòu)建和鑒定方法，該法包括：收集種子并種苗；菌種收集：供試玉米南方銹菌菌種采自多地的玉米南方銹病樣品，其中，除其中一地的菌株經(jīng)溫室人工擴(kuò)繁并收集夏孢子備用外，其余各地區(qū)的菌株均為直接從田間病株樣品上刮取夏孢子備用；在玉米大喇叭口期將所收集的菌種進(jìn)行田間接菌；根據(jù)田間發(fā)病后的病情指數(shù)挑選的接種不同地區(qū)菌株后，同時(shí)出現(xiàn)感病和抗病的并綜合多地區(qū)菌源呈現(xiàn)抗病的玉米品種；經(jīng)過二次純化，培養(yǎng)各地多個(gè)單孢系；將篩選出的抗病品種接種多個(gè)二次純化后的單孢系，選出同時(shí)可以抗病和感病的玉米品種；采用二進(jìn)制方法累加法對致病型分類；找出我國頻率最高的玉米多堆柄銹菌致病型。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種玉米銹菌致病型寄主的鑒定方法，具體講涉及一種中國玉米多堆柄銹菌致病型寄主體系構(gòu)建和鑒定方法。

背景技術(shù)

玉米南方銹病是由多堆柄銹菌Puccinia polysora Underw.引起的一種氣傳病害。玉米多堆柄銹菌主要危害部位是玉米的葉片和葉鞘，嚴(yán)重時(shí)也會侵染玉米莖和苞葉部位。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，葉片上會散生大量的孢子，殺死寄主組織，致葉片提早干枯死亡，尤其是在晚播玉米上，發(fā)病初期，侵染點(diǎn)附近首先會出現(xiàn)褪綠斑點(diǎn)，褪綠斑點(diǎn)此后會出現(xiàn)呈皰疹狀隆起孢子堆，葉片正反面均可產(chǎn)生夏孢子堆，通常以葉表居多，夏孢子堆黃色，顏色比玉米普通銹菌的顏色淺，多為圓形或卵圓形，初期埋生于寄主表皮組織下，后期夏孢子堆破裂后散生許多淡黃色的夏孢子。發(fā)病后期，冬孢子堆會在葉片的背面形成，圓形或橢圓形，顏色較夏孢子較深，棕褐色或近乎黑色，埋生玉米表皮組織下。

如今的玉米多堆柄銹菌變異情況暫不清楚。通常情況下，新致病性的優(yōu)勢集群的不斷出現(xiàn)，以及種植環(huán)境選擇，使得抗病品種的抗銹性隨著小種集群改變不斷喪失。但我國的研究處于初級階段，無論是生理小種和致病型的種類或者分布尚不清楚，我國大多數(shù)研究未考慮存在多個(gè)生理小種或致病性差異，無法立足生理小種或優(yōu)勢致病型的層面，缺少利用水平抗病性、垂直抗病性、成株期抗病性、慢銹性等提高玉米品種的整體抗銹性水平的基礎(chǔ)，品種推廣和抗病育種都無法與生理小種或優(yōu)勢致病型的現(xiàn)狀結(jié)合。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是明確中國玉米南方銹菌在我國的種類和分布，為將來抗病基因的合理布局以及藥劑防治輔助等多重手段實(shí)現(xiàn)玉米南方銹病的綜合治理和防控提供技術(shù)支持，進(jìn)一步對我國的致病型種類和分布以及主要優(yōu)勢致病型進(jìn)行更好的防控，并結(jié)合玉米品種的抗性評價(jià)，更好的推廣玉米品種，合理布局品種、研究生理小種、選育抗玉米南方銹病品種。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案如下：

一種玉米多堆柄銹菌致病型鑒別寄主體系構(gòu)建和鑒定方法，其改進(jìn)之處在于，將玉米多堆柄銹菌的單孢子堆接種到健康玉米苗上，發(fā)病后再次將已發(fā)病的玉米多堆柄銹菌的單孢子堆接種到健康玉米苗上經(jīng)轉(zhuǎn)接二次純化，獲得足量單孢系；

從28個(gè)玉米品種田間病情指數(shù)中挑出抗病品種，抗病品種接種多個(gè)二次純化的單孢系，篩選同時(shí)表現(xiàn)抗病和感病的玉米品種；

采用全國182個(gè)單孢系進(jìn)行鑒定并找出頻率高的致病型；

所述方法包括如下步驟：

(一)收集種子并種苗；

(二)菌種收集：供試玉米南方銹菌菌種采自海南三亞、廣東河源、廣西桂林、廣西河池、云南玉溪和湖南邵陽的玉米南方銹病樣品，其中，除海南菌株經(jīng)溫室人工擴(kuò)繁并收集夏孢子備用外其他地區(qū)菌株均為直接從田間病株樣品上刮取夏孢子備用；

(三)田間接菌：在玉米大喇叭口期將步驟(二)所收集的菌種進(jìn)行田間接菌；

(四)抗病品種篩選：根據(jù)田間發(fā)病后的病情指數(shù)挑選的接種不同地區(qū)菌株后，同時(shí)出現(xiàn)感病和抗病的并綜合多地區(qū)菌源呈現(xiàn)抗病的玉米品種；

(五)單孢系擴(kuò)繁：經(jīng)過二次純化，培養(yǎng)全國各地多個(gè)單孢系；