[發(fā)明專利]一種發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒株的分離方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110603537.7 | 申請日： | 2021-05-31 |
| 公開（公告）號： | CN113337477A | 公開（公告）日： | 2021-09-03 |
| 發(fā)明（設計）人： | 李家斌;殷俊;溫萌;胡立芬;葉英;劉艷艷;程君;陳振;柳燕;馬雪嬌;卞婷婷 | 申請（專利權(quán)）人： | 李家斌 |
| 主分類號： | C12N7/00 | 分類號： | C12N7/00 |
| 代理公司： | 合肥銘輝知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 34212 | 代理人： | 張立榮 |
| 地址： | 230000 安*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 發(fā)熱 血小板 減少 綜合征 病毒 分離 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒株的分離方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒感染Vero細胞，培養(yǎng)5-7天，待超過60％的細胞出現(xiàn)細胞病變效應后，收集細胞培養(yǎng)物上清液；
(2)使用0.22μm濾頭于生物安全柜中過濾步驟(1)中收集的細胞培養(yǎng)物上清液；
(3)準備超速離心管，在超速離心管底部加入8ml的濃度為20％的蔗糖溶液，形成蔗糖墊層；
(4)沿著步驟(3)中的超速離心管管壁，在蔗糖墊層上慢慢加入步驟(2)中過濾得到的細胞培養(yǎng)物上清液30ml；
(5)將步驟(4)中的超速離心管在4℃的溫度下離心，設置離心速度為40000g，離心時間為4h；
(6)離心結(jié)束后，倒置超速離心管，待試管內(nèi)液體流干，棄掉離心后的上清液及蔗糖墊層，保留超速離心管底部的沉淀物，即得純化的發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒株。
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