[發(fā)明專利]一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110602916.4 | 申請日： | 2021-05-31 |
| 公開（公告）號： | CN113322273A | 公開（公告）日： | 2021-08-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 侯亞莉;董文軒;趙玉輝;張梟;王碧君;楊淮策 | 申請（專利權(quán)）人： | 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/84 | 分類號： | C12N15/84;C12N15/53 |
| 代理公司： | 西安銘澤知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 崔瑞迎 |
| 地址： | 110866 *** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 瞬時 驗證 山楂 基因 功能 方法 | ||
1.一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法，其特征在于，包括如下步驟：
S1，擴增標(biāo)記基因山楂CpPDS片段，將其連接至TRV2載體上，獲得CpPDS-TRV2重組質(zhì)粒；
S2，將TRV1載體和CpPDS-TRV2重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌；
S3，將S2中鑒定為陽性的菌搖培至OD600值為0.8-1.2；
S4，將S3中獲得的含有TRV1和CpPDS-TRV2重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌菌液按照體積比0.9-1.1：1混勻；
S5，在山楂盛花后120天進行注射，注射部位為果實赤道處，注射量為90-110μl。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法，其特征在于，S3中，陽性的菌搖培至OD600值為1.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法，其特征在于，S4中，將含有TRV1和CpPDS-TRV2重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌菌液按照體積比1：1混勻。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法，其特征在于，S5中，所述注射量為100μl。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于瞬時驗證山楂基因功能的方法，其特征在于，S2中，所述農(nóng)桿菌為農(nóng)桿菌GV3101。
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