[發明專利]一種β-乳球蛋白的抗原表位肽、完全抗原、抗體以及測定β-乳球蛋白殘留量的方法

有效

• 申請號: 202110602455.0
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113549141B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 叢艷君;劉迪
• 申請（專利權）人: 北京工商大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 北京易捷勝知識產權代理有限公司 11613
• 代理人: 齊勝杰

1.一種β-乳球蛋白的抗原表位肽，其特征在于，所述抗原表位肽的氨基酸序列為CGAQALIVTQTMKGLDIQKVAGTWYS。

2.一種根據權利要求1所述的抗原表位肽和牛血清蛋白偶聯得到的完全抗原。

3.根據權利要求2所述的完全抗原，其特征在于，所述完全抗原通過戊二醛法偶聯制備。

4.一種多克隆抗體，其特征在于，所述多克隆抗體以權利要求2或權利要求3所述的完全抗原為抗原經過免疫兔或羊制備得到。

5.一種測定β-乳球蛋白殘留量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1：合成β-乳球蛋白作用表位肽，所述β-乳球蛋白作用表位肽的氨基酸序列為CGAQALIVTQTMKGLDIQKVAGTWYS；

S2：將步驟S1合成的β-乳球蛋白作用表位肽與牛血清蛋白進行偶聯，制備得到完全抗原；

S3：以步驟S2制備的完全抗原為抗原，制備得到單克隆抗體；

或者：

以步驟S2制備的完全抗原為抗原，制備得到多克隆抗體；

S4：以步驟S3制備得到的單克隆抗體或者多克隆抗體為一抗，采用間接競爭ELISA方法檢測不同蛋白酶水解β-乳球蛋白的水解液中β-乳球蛋白殘留量。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟S4中，采用間接競爭ELISA方法檢測時，

如果以作用表位的完全抗原免疫制備的單抗為測定用的一抗，其稀釋倍數為5000-10000倍；酶標二抗的稀釋倍數為500-2000倍；

如果以作用表位的完全抗原免疫制備的多克隆抗體為測定用的一抗，其稀釋倍數為200-300倍；酶標二抗的稀釋倍數為500-2000倍。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟S4中，

所述酶標二抗為HRP-羊抗鼠IgG或者HRP-羊抗兔IgG。