[發明專利]一種檢測農藥殘留的膠體金卡及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110602141.0
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113325180A
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 游冬;梁如中;周麗;鄒曉蘭;李林
• 申請（專利權）人: 無錫中德伯爾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/532;G01N33/531;G01N33/53
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明涉及一種檢測農藥殘留的膠體金卡及其制備方法和應用。所述膠體金卡包括底板和在底板上依次搭接的樣品墊、金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上設置有包被農藥抗原的檢測線和包被二抗的質控線，所述金結合墊含有膠體金標記的農藥抗體、蔗糖、十二水合磷酸氫二鈉、牛血清白蛋白、酪朊酸鈉、海藻糖和聚乙二醇。所述膠體金卡中，金結合墊含有蔗糖、十二水合磷酸氫二鈉、牛血清白蛋白、酪朊酸鈉、海藻糖和聚乙二醇，能夠有效保護抗原和抗體，消除茶水中茶多酚、黃酮類物質、色素和礦物質等對顯色的影響，提高了膠體金卡的抗干擾性。

技術領域

本發明屬于農藥檢測技術領域，涉及一種檢測農藥殘留的膠體金卡及其制備方法和應用，尤其涉及一種檢測茶葉中農藥殘留的膠體金卡及其制備方法和應用。

背景技術

農藥具備病蟲防治、去除雜草和調節植物生長的作用，在農業中被廣泛應用，但農作物殘留的農藥對人體亦具有危害。中國人飲茶有著幾千年的悠久歷史，也是茶葉的出口大國，因此，茶葉中農藥殘備受重視。

目前，農藥殘留檢測的主要手段仍然依賴液相色譜法、氣相色譜法、液相色譜-串聯質譜法、氣相色譜-質譜法等大型現代分析儀器，這類儀器雖然檢測靈敏度高，但儀器的價格昂貴，操作繁瑣，且周期長，難以滿足大批量樣品或臨時樣品的適時快速檢測，因此，人們致力于開發能夠快速、準確、便捷、低成本低檢測農藥殘留的方法。

CN101319997公開了適用于茶葉中農藥殘留快速檢測的卡片及其檢測方法，所述卡片由含有穩定劑的固定化酶片和顯色片組成，操作簡便，檢測時間短，能夠快速有效的鑒別出農藥殘留超標的茶葉，但準確性和抗干擾性較差。

CN105181949A公開了一種適用于茶葉中吡蟲啉等3種氯代煙堿類農藥多殘留速測的異源競爭免疫層析金標試紙條，該試紙條包括襯板、樣品墊、金標一抗結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊，金標一抗結合墊上包被有膠體金標記的吡蟲啉類特異性小鼠單抗，硝酸纖維素膜上包被有用于異源競爭的氯噻啉或噻蟲胺人工抗原的檢測線和包被有兔抗鼠IgG的質控線，可快速檢測茶葉中農藥殘留結果，但抗干擾性較差，顯色易被茶葉中的茶多酚、黃酮類物質、色素或礦物質影響。

綜上所述，提供一種抗干擾性強且可快速、準確檢測茶葉中農藥殘留的方法，對于農藥檢測技術領域具有重要意義。

發明內容

針對現有技術的不足和實際需求，本發明提供一種檢測農藥殘留的膠體金卡及其制備方法和應用，所述膠體金卡能夠直接檢測各種茶水基質，不受或者少受基質干擾的影響，從而避免檢測線不出線或出線弱的情況。

為達上述目的，本發明采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供一種檢測農藥殘留的膠體金卡，所述膠體金卡包括底板和在底板上依次搭接的樣品墊、金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上設置有包被農藥抗原的檢測線和包被二抗的質控線，所述金結合墊含有膠體金標記的農藥抗體、蔗糖、十二水合磷酸氫二鈉、牛血清白蛋白、酪朊酸鈉、海藻糖和聚乙二醇。

本發明中，在金結合墊中添加蔗糖、十二水合磷酸氫二鈉、牛血清白蛋白、酪朊酸鈉、海藻糖和聚乙二醇，可以避免茶葉中的茶多酚、黃酮類物質、色素和礦物質等復雜基質對于膠體金標記的農藥抗體和農藥抗原的影響，其中，蔗糖、海藻糖和聚乙二醇可以使膠體金標記的農藥抗體保持一定的親水性，避免了因抗體內部的疏水蛋白完全暴露，構象發生改變，進而造成抗體特異性結合能力下降，非特異性結合概率增加，檢測結果出現假陽性的可能；十二水合磷酸氫二鈉能維持整個體系的鹽離子濃度，提升蛋白的溶解量，并促進抗原抗體特異性反應；牛血清白蛋白和酪元酸鈉作為結合墊中的非特異性蛋白，能夠保護膠體金標記的農藥抗體的穩定性。