[發(fā)明專(zhuān)利]一種特異性識(shí)別PD-L1的納米抗體及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110596814.6
• 申請(qǐng)日: 2021-05-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113045662B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張廣華;劉云;陸陽(yáng);區(qū)文彩;阮月敏
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 西寶生物科技（上海）股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/28
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/28;C07K16/46;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;C12N7/01;G01N33/68;G01N33/543;A61K39/395;A61K47/68;A61P35/00;A61P31/18;A61P31/20;A61P31/1
• 代理公司: 上海三方專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 31127
• 代理人: 吳瑋

1.一種特異性識(shí)別PD-L1的納米抗體，所述納米抗體的互補(bǔ)決定區(qū)包括如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列CDR1、SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列CDR2和SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列CDR3。

2.如權(quán)利要求1所述的一種特異性識(shí)別PD-L1的納米抗體,其特征在于，所述納米抗體的骨架區(qū)包括如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列FR1、SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列FR2、SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列FR3和SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列FR4。

3.如權(quán)利要求2所述的一種特異性識(shí)別PD-L1的納米抗體,其特征在于，所述納米抗體的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.一種多核苷酸，其特征在于，其編碼權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體。

5.一種表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體中包括權(quán)利要求4所述的多核苷酸。

6.如權(quán)利要求5所述的一種表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體為pET28a。

7.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞內(nèi)包括權(quán)利要求5~6任一所述的表達(dá)載體，或其基因組中整合有權(quán)利要求4所述的多核苷酸。

8.如權(quán)利要求7所述的一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為大腸桿菌。

9.一種納米抗體噬菌體，其特征在于，所述噬菌體的表面包括權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體。

10.一種用于檢測(cè)PD-L1的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體或權(quán)利要求9所述的納米抗體噬菌體。

11.如權(quán)利要求10所述的一種用于檢測(cè)PD-L1的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括固相載體，所述的納米抗體或納米抗體噬菌體被固定于固相載體中。

12.如權(quán)利要求11所述的一種用于檢測(cè)PD-L1的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括能與所述的納米抗體連接的可檢測(cè)標(biāo)記物，所述的可檢測(cè)標(biāo)記物被連接于所述的納米抗體或分離地存在于試劑盒中；和/或PD-L1標(biāo)準(zhǔn)品或PD-L1偶聯(lián)物標(biāo)準(zhǔn)品；和/或與可檢測(cè)標(biāo)記物相對(duì)應(yīng)的底物；和/或酶聯(lián)免疫反應(yīng)試劑。

13.一種用于非疾病診斷和治療目的的檢測(cè)待測(cè)樣品中PD-L1存在情況的方法，其特征在于，包括以下步驟：S1、以權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體或權(quán)利要求9所述的納米抗體噬菌體作為PD-L1的檢測(cè)抗體，通過(guò)酶聯(lián)免疫反應(yīng)法來(lái)檢測(cè)待測(cè)樣品中PD-L1的存在情況。

14.如權(quán)利要求13所述的一種用于非疾病診斷和治療目的的檢測(cè)待測(cè)樣品中PD-L1存在情況的方法，其特征在于，所述步驟S1中，具體包括以下步驟：將待測(cè)樣品包被于固相載體上，以攜帶或不攜帶可檢測(cè)標(biāo)記物的所述的納米抗體或所述的納米抗體噬菌體作為檢測(cè)抗體，檢測(cè)PD-L1的存在情況。

15.一種免疫綴合物，其特征在于，包括治療劑和與所述治療劑綴合的如權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體，所述治療劑包括放射性同位素或藥物。

16.一種雙特異性抗體，其特征在于，包括權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體，以及與所述納米抗體功能性連接的具有另一種抗原結(jié)合特性的抗體或抗體片段。

17.一種藥用組合物，其特征在于，包括權(quán)利要求1~3任一所述的納米抗體，以及可藥用賦形劑、載體或稀釋劑。