[發明專利]一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法

有效

• 申請號: 202110595870.8
• 申請日: 2021-05-29
• 公開（公告）號: CN113265483B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發明（設計）人: 張曉軍;喬麟軼;李欣;賈舉慶;郭慧娟;張樹偉;常利芳;陳芳;暢志堅
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

本發明公開了一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法。涉及植物分子遺傳育種技術領域。包括提取植株基因組DNA，進行PCR擴增；若擴增得到任一目標片段，則具有中間偃麥草4St染色體基因。本發明發現的分子標記可用于小麥與中間偃麥草遠緣雜交過程中中間偃麥草染色體工程系(染色體附加系、代換系、易位系和雙二倍體)中4St染色體或4St染色體片段的快速檢測。本發明對于小麥遺傳育種的理論研究和實際應用均有重要價值。

技術領域

本發明涉及植物分子遺傳育種技術領域，更具體的說是涉及一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法。

背景技術

自20世紀90年代起，世界小麥單產開始出現徘徊不前的局面，其主要原因是在小麥育種中長期使用少數主栽品種作為親本，導致遺傳基礎越來越狹窄，在單產潛力提高有限的情況下，品種的抗病、抗逆、抗蟲等能力逐漸下降，使現有品種抵抗災害風險的能力降低。種質資源作為基因的重要載體，被稱為農業領域的“芯片”，隨著各國基因資源爭奪日益白熱化，種質資源短缺已成為制約種業發展和作物品種實現重大突破的主要技術瓶頸。

通過遠緣雜交轉移偃麥草屬植物的優異基因進入小麥，是增加小麥變異類型、拓寬小麥遺傳背景、夯實小麥育種基礎的重要途徑之一。在小麥遺傳改良中，偃麥草屬的中間偃麥草(Thinopyrum intermedium,2n＝6x＝42,JJsS)是利用最為成功的多年生野生近緣植物，蘊含許多能夠增強小麥抗性、改善小麥品質的有益基因，是小麥遺傳改良的重要基因資源之一。自從20世紀20年代Dr.N.V.Tsitsin等首次將小麥與偃麥草屬植物雜交成功以來，國內外學者通過遠緣雜交和染色體工程的方法，誘導偃麥草的外源基因滲入小麥遺傳背景中，先后創制了大量包括雙二倍體或部分雙二倍體、附加系、代換系和易位系等在內的小麥-中間偃麥草和小麥-長穗偃麥草的異源染色體系，并通過回交、輻射等手段，成功培育出許多抗病、優質、高產的小麥新品種，例如小偃6號、小偃503、小偃22、西農509、西農511、西農529等，在小麥生產及抗病、抗逆研究中被廣泛應用。這些含小麥近緣植物血緣的異染色體系是研究物種染色體行為與進化、基因定位與克隆的重要素材，也是拓寬小麥遺傳基礎、抵御小麥重要病蟲害、增加小麥產量和提升小麥品質的重要物質基礎。

外源染色體的準確鑒定是研究與利用中間偃麥草的重要前提，長期以來，中間偃麥草外源染色體鑒定一直以細胞學手段包括C-帶、N-帶、GISH、FISH為主，分子標記技術的發展為其分子鑒定提供了新的發展方向。但迄今為止，識別度有限。

因此，如何提供一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法是本領域技術人員亟需解決的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法，包括：

1)提取植株基因組DNA，進行PCR擴增；

2)若擴增得到下列任一目標片段，則具有中間偃麥草4St染色體基因；

目標片段包括如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6的核苷酸序列。

優選的：PCR擴增引物對包括如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8的引物序列，或如SEQID NO.9、SEQ ID NO.10的引物序列，或如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12的引物序列，或如SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14的引物序列，或如SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16的引物序列，或如SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.18的引物序列中的一對或多對。