[發(fā)明專利]一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110595870.8
• 申請(qǐng)日: 2021-05-29
• 公開（公告）號(hào): CN113265483B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張曉軍;喬麟軼;李欣;賈舉慶;郭慧娟;張樹偉;常利芳;陳芳;暢志堅(jiān)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

1.一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法，其特征在于，包括：

提取植株基因組DNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

若擴(kuò)增得到下列任一目標(biāo)片段，則具有中間偃麥草4St染色體基因；

所述目標(biāo)片段包括如SEQ ID NO .1~SEQ ID NO .6所示的核苷酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法，其特征在于，所述PCR的擴(kuò)增引物對(duì)包括如SEQ ID NO .7和SEQ ID NO .8所示的引物序列，或如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO .10所示的引物序列，或如SEQ ID NO .11和SEQ ID NO .12所示的引物序列，或如SEQ ID NO .13和SEQ ID NO .14所示的引物序列，或如SEQ ID NO .15和SEQ IDNO .16所示的引物序列，或如SEQ ID NO .17和SEQ ID NO .18所示的引物序列中的一對(duì)或多對(duì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法，其特征在于，所述PCR的擴(kuò)增體系：2×Taq PCR Mix預(yù)混液5 μL，50 ng/μL的上游引物1 μL，50 ng/μL的下游引物1 μL，50~100 ng/μL的模板DNA為1.5 μL，1.5 μL無菌去離子水，反應(yīng)體系總體積為10 μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的方法，其特征在于，所述PCR的擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性5分鐘；94℃變性30秒，58℃退火45秒，72℃延伸30秒，運(yùn)行35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10分鐘，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在4℃保存。

5.一種快速鑒定中間偃麥草4St染色體的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求2所述的擴(kuò)增引物對(duì)。

6.權(quán)利要求1~4任一所述方法或權(quán)利要求5所述的試劑盒在小麥遺傳育種中的應(yīng)用，其特征在于，用于快速鑒定中間偃麥草4St染色體。