[發明專利]一種透明質酸檢測試劑盒及其方法

在審

• 申請號: 202110595457.1
• 申請日: 2021-05-29
• 公開（公告）號: CN113433064A
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 靳曉黎;孟琛;孫小芳
• 申請（專利權）人: 北京華宇億康生物工程技術有限公司
• 主分類號: G01N21/01
• 分類號: G01N21/01;G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種透明質酸檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒包含試劑R1和R2和校準品，其中試劑R1中包含緩沖液、氯化鈉、防腐劑以及穩定劑；試劑R2包含活化緩沖液、包被緩沖液、封閉液、貯存緩沖液，以及膠乳微球和HABP，以及偶聯劑。

2.根據權利要求1所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1組分濃度為：緩沖液 0.1-100 mmol/L、氯化鈉1-20g/L、防腐劑0.1-10g/L、穩定劑0.1-10 g/L；所述試劑R2組分濃度為：活化緩沖液 0.1-100 mmol/L、包被緩沖液 0.1-100 mmol/L、封閉液 0.1-100 mmol/L、貯存緩沖液 0.1-100 mmol/L、膠乳微球1-100ml/L、HABP 2-200ml/L、偶聯劑10.1-5g/L，偶聯劑2 0.05-2.5g/L。

3.根據權利要求2所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1組分濃度為：緩沖液 25mmol/L、氯化鈉9g/L、防腐劑5g/L、穩定劑5 g/L；所述試劑R2組分濃度為：活化緩沖液50 mmol/L、包被緩沖液 50mmol/L、封閉液 25 mmol/L、貯存緩沖液 50 mmol/L、膠乳微球30ml/L、HABP 50ml/L、偶聯劑1 1g/L，偶聯劑2 0.5g/L。

4.根據權利要求1-3所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，試劑R1中，所述的緩沖液為磷酸緩沖液、Tris-HCl，MES緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或幾種；試劑R2中，所述的活化緩沖液為磷酸緩沖液、Tris-HCl，MES緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或幾種，所述的包被緩沖液為磷酸緩沖液、Tris-HCl，MES緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或幾種，所述的封閉液液為磷酸緩沖液、Tris-HCl，MES緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或幾種，并在其中加入牛血清白蛋白，所述的貯存緩沖液為磷酸緩沖液、Tris-HCl，MES緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或幾種。

5.根據權利要求4所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1和試劑R2中的緩沖液的PH值為5.0-9.0。

6.根據權利要求1-3所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，試劑R1中的穩定劑為PEG系列。

7.根據權利要求1-3所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，試劑R1中的防腐劑為疊氮鈉、亞硝酸鈉、Proclin系列。

8.根據權利要求1-3所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，試劑R2中的偶聯劑為N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺（EDC）。

9.根據權利要求1-3所述的透明質酸檢測試劑盒，其特征在于，試劑R2中的膠乳微球的粒徑為0.08-0.5μm。

10.根據權利要求1-9所述，透明質酸檢測試劑盒的檢測方法包括如下步驟：

（1）依次加入試劑R1，待測樣本，混勻，37℃下溫育4-10分鐘，后加入試劑R2，混勻，37℃溫育4-10分鐘后，600nm波長下測定吸光度；

（2）根據定標的標準曲線計算待測樣品中透明質酸的濃度。

11.根據權利要求10所述，其特征在于，所述的標準曲線采用透明質酸校準品定標。

12.根據權利要求11所述，其特征在于，透明質酸校準品的濃度為0-1000ng/mL。