[發明專利]一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的制備方法及應用

有效

• 申請號: 202110591228.2
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113295867B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發明（設計）人: 李月云;商晴;唐峰
• 申請（專利權）人: 山東理工大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N27/48;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于新型納米復合材料、免疫分析和生物傳感技術領域，本發明涉及一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的制備方法及應用，采用負載金納米粒子的碳化ZIF?L納米復合材料作為基底，鈀銀銅介孔納米球作為信號放大材料，制備的夾心型電化學免疫傳感器具有特異性強，靈敏度高和低檢出限等優點，對于腫瘤早期鑒別診斷、病情監測、療效評價等方面具有重要的科學意義和應用價值。

技術領域

本發明屬于新型納米復合材料、免疫分析和生物傳感技術領域，提供了一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的構建方法，應用于腫瘤標志物抗原的檢測。

背景技術

癌癥已成為人們備受關注的健康問題之一，癌胚抗原是一種廣譜腫瘤標志物，是早期診斷癌癥的特異性標志物，在惡性腫瘤的鑒別診斷、病情監測、療效評價等方面，具有重要臨床價值，因而要求檢測方法靈敏、快速、準確。近年來，由于電化學儀器使用方便，檢測迅速，電化學免疫傳感器的研究備受關注，用于腫瘤標志物抗原的定量檢測。

電化學免疫傳感器是集生物傳感與電化學分析于一體，基于抗原和抗體特異性結合的一種分析方法，具有靈敏度高、檢測限低和制備成本低的優點，對腫瘤標志物的實際檢測具有重要價值。

二維葉片狀金屬有機骨架ZIF-L是一種通過配位作用自組裝形成的具有二維規則形貌的無機-有機雜化晶態材料，骨架穩定、組成易調節等特性，兼具傳統沸石高化學穩定性和熱穩定性。在高溫焙燒后，碳化ZIF-L材料的孔隙度可部分保留，具有較高的比表面積和豐富的孔結構，同時材料的缺陷程度及導電性得到了大幅提升。碳化后ZIF-L的氮含量高，電負性強，易于結合金納米粒子，不但能高效傳遞電荷，而且可以為捕獲抗體的孵化提供良好的微環境，穩定地結合捕獲抗體，從而提高電化學免疫傳感器工作電極傳感界面構筑的穩定性；鈀銀銅介孔納米球具有豐富的介孔互通孔隙，優良的過氧化氫催化能力，可以有效放大電響應信號，提升電化學免疫傳感器的靈敏度，而且合成工藝采用一種綠色、簡單、高效的制備方法。

本發明利用層層自組裝技術，以金納米粒子/碳化ZIF-L為基底，以鈀銀銅介孔納米球作為檢測抗體標記物構建的一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器，其具有檢測范圍寬、檢測限低、操作簡單、檢測速度快等優點，并且具有良好的重現性、穩定性和選擇性，對癌癥的早期鑒別診斷具有重要的應用價值。

發明內容

本發明提供了一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的構建方法及應用，實現了對腫瘤標志物抗原的靈敏檢測。

本發明的目的之一是提供一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的構建方法。

本發明的目的之二是將所制備的一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器用于腫瘤標志物抗原的檢測。

本發明的技術方案，包括以下步驟：

1.?一種鈀銀銅介孔納米球信號放大的電化學免疫傳感器的構建方法，步驟如下：

（1）將直徑為3.0?~?5.0?mm的玻碳電極用Al₂O₃拋光粉打磨，超純水清洗干凈；

（2）將6.0?μL、1.0?~?2.0?mg/mL的金納米粒子/碳化ZIF-L分散液滴加到電極表面，室溫下晾干，超純水沖洗電極表面，晾干；

（3）將6.0?μL、5.0?~?15.0?μg/mL的腫瘤標志物捕獲抗體Ab₁滴加到電極表面，超純水沖洗，4?°C冰箱中晾干；

（4）繼續將4?μL、0.8?~?1.2?mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到電極表面，超純水沖洗電極表面，4?°C冰箱中晾干；

（5）繼續滴加6.0?μL、10.0?fg/mL?~?100.0?ng/mL的一系列不同濃度的腫瘤標志物抗原溶液，超純水沖洗電極表面，4?°C冰箱中晾干；