[發明專利]一種基于雙磁性納米粒子檢測氨基甲酸酯類農藥的方法

有效

• 申請號: 202110590625.8
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113219104B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 王淼;王靜;朱永安;金芬;佘永新;曹振;鄭鷺飛;邵華
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/74
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 申星宇

本發明公開了一種基于雙磁性納米粒子檢測氨基甲酸酯類農藥的方法，包括采用有機溶劑提取農產品樣品中的農藥殘留；B加入C18修飾的小粒徑磁性納米粒子對所述提取液中農藥殘留進行吸附富集，棄去上清；加入甲醇,洗脫所述C18修飾的小粒徑磁性納米粒子上富集的農藥殘留，磁分離得到洗脫液；將所述洗脫液加入4倍體積的PBS水溶液按照1：4混合后，加入磁性介孔二氧化硅包覆的乙酰膽堿酯酶，反應20?40min；加入顯色液進行顯色反應；本發明基于C18修飾的磁性納米粒子對提取液中農藥殘留的吸附富集作用，結合磁性介孔二氧化硅包覆的膽堿酯酶對有機溶劑的耐受性，可用于水果蔬菜等農產品中氨基甲酸酯類農藥的檢測。

技術領域

本發明屬于生化檢測技術領域，尤其涉及一種基于雙磁性納米粒子檢測氨基甲酸酯類農藥的方法。

背景技術

氨基甲酸酯類農藥是一種高效、廣譜型殺蟲劑。其殺蟲作用機制為抑制昆蟲神經傳導的重要物質乙酰膽堿酯酶的活性。氨基甲酸酯類農藥具有殺蟲效果顯著、分解快、殘留期短、代謝迅速的特點。但由于不科學地使用氨基甲酸酯類農藥，如不按規定的用藥量、用藥次數和用藥方法以及安全間隔期施用，或施用不允許在糧食、蔬菜上使用的農藥等，都有可能造成農殘超標，導致人畜中毒現象時有發生。因此許多國家和地區對這種農藥在食品中的殘留量都制定了嚴格的限量標準，這就使得氨基甲酸酯類農藥的分析檢測倍受關注。

目前酶抑制法在蔬菜中氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速測定已有國家標準方法即酶抑制速測法，此法可快速檢測農產品中氨基甲酸酯農藥的殘留，所用的儀器設備較簡單，成本較低，已廣泛用于基層質監站、農產品批發市場等場所。

但是由于該方法的基本原理是提取農產品中的有機磷或氨基甲酸酯類農藥，與乙酰膽堿酯酶發生反應，抑制乙酰膽堿酯酶的催化底物水解的活性，使顯色反應受到抑制，通過顏色的深淺判斷體系中農藥殘留的多少。該方法在檢測氨基甲酸酯類農藥時存在如下問題：該方法使用的農藥提取液以水相為主，而氨基甲酸酯類農藥在水相中溶解度較小，導致農藥殘留提取不充分，影響了檢測效果；若使用含有一定濃度有機相的提取液以提高提取效率，提取液中的有機溶劑又會影響乙酰膽堿酯酶的活性，同樣對檢測結果造成不利影響。針對上述問題，需要一種基于雙磁性納米粒子檢測氨基甲酸酯類農藥的方法。

發明內容

本發明提供一種基于雙磁性納米粒子檢測氨基甲酸酯類農藥的方法。

本發明包括以下步驟：

A采用有機溶劑提取農產品樣品中的農藥殘留得到提取液；

B加入C18修飾的小粒徑磁性納米粒子對所述提取液中農藥殘留進行吸附富集，棄去上清；

C加入甲醇,洗脫所述C18修飾的小粒徑磁性納米粒子上富集的農藥殘留，磁分離得到洗脫液；

D將所述洗脫液加入4倍體積的pH7.5,0.01Mol/LPBS水溶液按照1：4混合后，加入磁性介孔二氧化硅包覆的乙酰膽堿酯酶，反應20-40min；

E反應結束后磁分離棄去上清液，加入顯色液進行顯色反應；

F分離顯色液上清進行分光光度法檢測。

所述有機溶劑提取農產品樣品中的農藥殘留的方法包括：按照每10g待檢測樣品中加入20mL乙腈溶液，在所述溶液中按照質量比4:1:2依次加入氯化鈉和無水硫酸鎂，振蕩搖勻靜置分層后取上清液得到提取液。

進一步地，C18修飾的磁性納米粒子Fe₃O₄@SiO₂制備方法包括將Fe₃O₄@SiO₂納米粒子按照每1g加入2mL二甲基十八烷基氯硅烷和500mL異丙醇超聲10min，于70℃攪拌6h得到C18修飾的Fe₃O₄@SiO₂納米粒子。