[發明專利]一種簡易的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制備方法

有效

• 申請號: 202110588425.9
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113234605B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 陳建;焦春偉;謝意珍;吳清平;陳家明
• 申請（專利權）人: 廣東粵微生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01G18/20;A01G18/40;C12R1/645
• 代理公司: 廣州弘邦專利商標事務所有限公司 44236
• 代理人: 程長文

本發明屬于菌種制備技術領域，公開了一種簡易的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制備方法。所述制備方法為：將暗褐網柄牛肝菌子實體組織塊接種至固體培養基中培養，得到暗褐網柄牛肝菌固體菌種，將所得固體菌種打成菌塊后接種至液體培養基中培養，得到暗褐網柄牛肝菌液體菌種。本發明所述培養基由葡萄糖，可溶性淀粉，酵母粉，KH₂PO₄，MgSO₄和瓊脂組成。培養基成分簡單，使用了易獲取的碳源、氮源以及一些無機鹽。所得固體菌種菌絲濃密，邊緣整齊，顯示出極強的菌絲活力；所得液體菌種生長速度快、菌絲球均勻且細小，適合于現代化食用菌自動接種機接種。

技術領域

本發明屬于菌種制備技術領域，具體涉及一種簡易的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制備方法。

背景技術

暗褐網柄牛肝菌(Phlebopusportentosus)屬于牛肝菌目小牛肝菌科，脈柄牛肝菌屬。最早發現于斯里蘭卡，隨后在越南、泰國等東南亞國家，美洲的巴西和墨西哥以及大洋洲的澳大利亞、新西蘭等均有報道，國內主要分布于廣西、云南等地。暗褐網柄牛肝菌子實體肥大，味道鮮美，屬于高蛋白、低脂肪，備受群眾喜愛的名貴食用菌。雖然暗褐網柄牛肝菌能夠人工栽培，但大規模液體菌種制作以及優化等方面還需加強。

目前，暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種培養基均普遍采用沸水煮土豆，并通過過濾方式，獲得的土豆汁作為基礎培養基成分。比如：張春霞等以土豆汁作為培養基成分之一，篩選暗褐網柄牛肝菌母種培養基(張春霞,何明霞,紀開萍,etal.暗褐網柄牛肝菌母種培養基的篩選[J].西南農業學報2009.22(6):1699-1701)；HASSAN SidikMohamed等雖然改良了暗褐網柄牛肝菌的PDA培養基，但土豆汁仍是培養基的主成分之一(HASSANSidikMohamed，郭旭新,吳崢妍,潘晨晨,徐孟濤,柳永.一株暗褐網柄牛肝菌的分離與培養基優化[J].2021.62(1):83-86)。此外，專利文獻(CN101381684A)中報道使用馬鈴薯、蔗糖等制作固體和液體菌種；專利文獻(CN106929432A)中提及使用沸水煮去皮土豆，獲得的土豆汁作為培養基主要成分，用于暗褐網柄牛肝菌液體菌種制作。由于經過沸水煮與過濾才可獲得土豆汁，因而該方法只適合用于小規模的固體和液體菌種制作，對于大規模工廠化生產用的液體菌種，該方法存在操作繁瑣、成本偏高等明顯的缺點。此外，當前制作的暗褐網柄牛肝菌液體菌種，存在菌球過大、菌絲密度低等問題。菌球過大易堵塞現代化食用菌液體自動接種機噴嘴口；菌絲密度低易導致接種后菌包污染。因而，迫切需要提供一種簡易高效的，能夠用于工廠化栽培的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制作方法。

發明內容

針對以上現有技術存在的缺點和不足之處，本發明的目的在于提供一種簡易的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制備方法。

本發明目的通過以下技術方案實現：

一種簡易的暗褐網柄牛肝菌固體和液體菌種的制備方法，包括如下制備步驟：

(1)將暗褐網柄牛肝菌子實體組織塊接種至固體培養基中培養，得到暗褐網柄牛肝菌固體菌種；

(2)將步驟(1)所得固體菌種打成菌塊后接種至液體培養基中培養，得到暗褐網柄牛肝菌液體菌種；

步驟(1)中所述固體培養基組成為：葡萄糖(w/v)2～6％，可溶性淀粉(w/v)0.1～2％，酵母粉(w/v)1～4％，KH₂PO₄0.05～1％，MgSO₄0.05～1％，瓊脂1～3％，其余為水；固體培養基pH為4.0～6.0；

步驟(2)中所述液體培養基組成為：葡萄糖(w/v)2～6％，可溶性淀粉(w/v)0.1～2％，酵母粉(w/v)1～4％，KH₂PO₄0.05～1％，MgSO₄0.05～1％，其余為水；液體培養基pH為4.0～6.0。