[發(fā)明專利]一種脯氨酸原料藥的提純方法

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• 申請日: 2021-05-27
• 公開（公告）號: CN113307756A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳曉雙;寧健飛;蔡立明
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫晶海氨基酸股份有限公司
• 主分類號: C07D207/16
• 分類號: C07D207/16
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

本發(fā)明公開了一種脯氨酸原料藥的提純方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明將脯氨酸洗脫液過335型弱堿性陽離子樹脂、110型弱酸性陽離子樹脂，再用活性炭脫色，經(jīng)抽濾、過微孔濾膜后，真空濃縮至起晶、抽濾、離心，烘干得粗品；粗品用乙醇溶解、再結(jié)晶后，抽濾、離心、烘干得脯氨酸樣品。本發(fā)明所得樣品中無丙氨酸、無谷氨酸、無賴氨酸，雜酸去除率100％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種脯氨酸原料藥的提純方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)

脯氨酸是一種環(huán)狀的亞氨基酸，在組成蛋白質(zhì)的常見20種氨基酸中唯一的亞氨基酸。脯氨酸是植物蛋白質(zhì)的組分之一，并可以游離狀態(tài)廣泛存在于植物體中。

脯氨酸可作為氨基酸類藥，用于營養(yǎng)不良、蛋白質(zhì)缺乏癥、嚴(yán)重胃腸道疾病，燙傷及外科手術(shù)后的蛋白質(zhì)補(bǔ)充，無明顯毒副作用。

傳統(tǒng)L-脯氨酸生產(chǎn)方式為水解法，蛋白質(zhì)經(jīng)過酸、堿或者酶解后，得到各類氨基酸的混合物，可從中提取到所需的L-脯氨酸。所用的原料為橡皮魚、明膠、毛發(fā)等，但由于生產(chǎn)和純化的步驟多導(dǎo)致最終產(chǎn)率低，原料利用率低，而且生產(chǎn)的過程加入大量有毒化工原料，無法實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。

隨著微生物生物技術(shù)研究的不斷發(fā)展，生物下游工業(yè)的革新，各種化學(xué)工業(yè)技術(shù)的不斷引進(jìn)，使得氨基酸微生物發(fā)酵的成本越來越低，微生物生物發(fā)酵法為實現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)L-脯氨酸提供了有力的支持。現(xiàn)今，市場上的脯氨酸大部分是以工業(yè)微生物發(fā)酵所得。但，脯氨酸用作原料藥時，需控制雜酸的含量。

發(fā)明內(nèi)容

[技術(shù)問題]

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是對發(fā)酵所得脯氨酸進(jìn)行純化，控制雜酸含量滿足原料藥的要求。

[技術(shù)方案]

本發(fā)明提供一種脯氨酸原料藥的提純方法，包括以下步驟：

(1)將脯氨酸發(fā)酵液上732陽離子交換樹脂后，用氫氧化鈉洗脫得到的脯氨酸洗脫液，將脯氨酸洗脫液過335型弱堿性陽離子樹脂，收集流出液體；

(2)把步驟(1)得到的流出液體過110型弱酸性陽離子樹脂，得到二次流出液體；

(3)把步驟(2)得到的二次流出液體加熱至55-60℃，加10-15％活性炭脫色30min，抽濾、過微孔濾膜后，進(jìn)行真空濃縮至起晶，倒出晶體冷卻至室溫，抽濾、離心，烘干得粗品1；

(4)取粗品1，用90％乙醇加熱使粗品溶解，于80℃邊攪拌邊冷卻結(jié)晶，直至冷卻至15℃，抽濾、離心、烘干得脯氨酸樣品。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟(1)將10L脯氨酸洗脫液過2L的335型弱堿性陽離子樹脂，流速1.2L/h，得到10L流出液體。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟(2)把步驟(1)得到的流出液體過110型弱酸性陽離子樹脂，流速1.2L/h，得到10L二次流出液體。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟(3)把步驟(2)得到的二次流出液體加熱至60℃，加10％活性炭脫色30min，抽濾、過微孔濾膜后，進(jìn)行真空濃縮至起晶，倒出晶體冷卻至室溫，抽濾、離心，烘干得粗品1。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟(4)取粗品1，加入到90％乙醇并加熱至80℃使粗品溶解，于80℃邊攪拌邊冷卻結(jié)晶，直至冷卻至15℃，抽濾、離心、60℃烘干4h得脯氨酸樣品。

[有益效果]

本發(fā)明結(jié)合335型弱堿性陽離子樹脂、110型弱酸性陽離子樹脂，和活性炭脫色、結(jié)晶純化，使得樣品中無丙氨酸、無谷氨酸、無賴氨酸，雜酸去除率100％。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例和對比例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述。