[發明專利]與苦瓜白粉病抗性主效QTL Pm3.1緊密連鎖的InDel分子標記與應用

在審

• 申請號: 202110579872.8
• 申請日: 2021-05-26
• 公開（公告）號: CN113151572A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 馮誠誠;黃如葵;琚茜茜;梁家作;陳小鳳;黃熊娟;黃玉輝;劉杏連
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧公平知識產權代理有限公司 45104
• 代理人: 黃宗全

1.一種苦瓜白粉病抗性主效QTL Pm3.1緊密連鎖的InDel分子標記，其特征在于該分子標記為InDel0362，它具有序列表中SEQ.ID.NO.1的堿基序列。

2.根據權利要求1所述的InDel分子標記，其特征在于該分子標記由引物InDel0362 F和InDel0362 R擴增而得，引物InDel0362 F和InDel0362 R分別具有序列表中SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.3的堿基序列。

3.用于擴增權利要求1所述InDel分子標記的引物對，其特征在于：所述引物對包括引物InDel0362 F和InDel0362 R，它們分別具有序列表中SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.3的堿基序列。

4.權利要求3所述的引物對在擴增權利要求1所述InDel分子標記中的應用。

5.根據權利要求4所述的的應用，其特征在于所述擴增中的退火溫度為52℃。

6.根據權利要求5所述的的應用，其特征在于所述擴增的反應體系和反應程序為：

反應體系共10μL：1.0μL濃度50ng/μL的模板DNA；10μmol.L^-1的上游外引物1.0μL；10μmol.L^-1的下游外引物1.0μL；10×buffer 2.0μL；2m mol.L^-1的dNTP 2.0μL；50μmol.L^-1的MgCl₂ 0.8μL；Taq酶0.2μL；ddH₂O 2.0μL；

PCR反應程序為：94℃預變性5min；94℃變性45s，52℃退火45s，72℃延伸1min；共32個循環；72℃延伸7min；15℃保存備用。

7.一種苦瓜白粉病抗性鑒定的PCR檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒中包括權利要求3所述的引物對。

8.根據權利要1求7所述的PCR檢測試劑盒，其特征在于包括：10μmol.L^-1的上游外引物、10μmol.L^-1的下游外引物、10×buffer、2m mol.L^-1的dNTP、50μmol.L^-1的MgCl2、Taq酶。

9.權利要求1所述的InDel分子標記、權利要求3所述的引物對、權利要求7所述的PCR檢測試劑盒在苦瓜抗白粉病育種、苦瓜白粉病抗性篩選中的應用。

10.一種苦瓜白粉病抗性的判斷方法，其特征在于：通過PCR法檢測苦瓜3號染色體上權利要求要求1所述與苦瓜白粉病主效QTL Pm3.1緊密連鎖的InDel分子標記的插入缺失情況進行判斷；如擴增出僅有277bp片段，則鑒定為高感或感病苦瓜；如擴增出500bp和300bp的特異片段，則鑒定為高抗和抗病苦瓜。