[發明專利]一種棉花隱性核不育恢復同源基因對及其敲除試劑在創造不育系中的應用有效
| 申請號： | 202110575412.8 | 申請日： | 2021-05-26 |
| 公開（公告）號： | CN113278629B | 公開（公告）日： | 2022-04-15 |
| 發明（設計）人： | 閔玲;吳元龍;馬歡歡;池華斌;張獻龍 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385 | 代理人： | 戴嵩瑋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 棉花 隱性 不育 恢復 同源 基因 及其 試劑 創造 中的 應用 | ||
1.一種用于敲除棉花隱性核不育恢復同源基因對GhCYP703A2_A/D的sgRNA組，其特征在于，所述sgRNA組包括sgRNA1和sgRNA2；
所述sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；
所述sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；
所述棉花隱性核不育恢復同源基因對包括以下情形中的一種DNA序列：
1)核苷酸序列如SEQ NO：1和SEQ NO：2中所示的DNA序列；和
2)編碼氨基酸序列SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示蛋白質的DNA序列。
2.根據權利要求1所述sgRNA組，其特征在于，所述編碼氨基酸序列SEQ ID NO：3和SEQID NO：4所示蛋白質的DNA序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。
3.一種用于基因編輯所述棉花隱性核不育恢復同源基因對GhCYP703A2_A/D的CRISPR/Cas9系統，其特征在于，包括權利要求1或2所述sgRNA組。
4.根據權利要求3所述CRISPR/Cas9系統，其特征在于，所述CRISPR/Cas9系統包括Cas9蛋白的T-DNA序列。
5.根據權利要求4所述CRISPR/Cas9系統，其特征在于，所述Cas9蛋白的T-DNA序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：9中所示。
6.權利要求1或2所述sgRNA組或權利要求3～5任意一項所述CRISPR/Cas9系統在創制棉花不育系中的應用。
7.根據權利要求6所述應用，其特征在于，所述棉花不育系包括棉花細胞核雄性不育系。
8.根據權利要求6或7所述應用，其特征在于，所述棉花包括陸地棉。
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