[發(fā)明專利]托品酮生物合成融合蛋白及其應(yīng)用和方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110572747.4 | 申請日： | 2021-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN113307884B | 公開（公告）日： | 2022-04-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 曾俊嵐;廖志華;邱飛;劉雪超;陳敏;楊春賢 | 申請（專利權(quán)）人： | 西南大學(xué) |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/62;C12P17/18 |
| 代理公司： | 重慶航圖知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 50247 | 代理人： | 王貴君 |
| 地址： | 400715*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 托品酮 生物 合成 融合 蛋白 及其 應(yīng)用 方法 | ||
1.托品酮生物合成融合蛋白，其特征在于：所述托品酮生物合成融合蛋白由III型聚酮合酶PYKS和托品酮合成酶CYP82M3通過連接肽連接，所述III型聚酮合酶PYKS位于連接肽的羧基端，所述托品酮合成酶CYP82M3位于連接肽的氨基端；所述III型聚酮合酶PYKS的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述托品酮合成酶CYP82M3的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述托品酮生物合成融合蛋白，其特征在于：所述連接肽為3xGGGGS，2xGGGGS或GGSGGGGG。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述托品酮生物合成融合蛋白，其特征在于：所述托品酮生物合成融合蛋白的編碼序列如SEQ ID NO.11所示。
4.權(quán)利要求1或2所述托品酮生物合成融合蛋白在提高托品酮或托品烷生物堿合成能力中的應(yīng)用。
5.提高托品酮或托品烷生物堿合成能力的核苷酸，其特征在于：其編碼如權(quán)利要求1～4任一項所述托品酮生物合成融合蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的核苷酸，其特征在于：所述核苷酸的序列如SEQ ID NO.11所示。
7.提高托品酮或托品烷生物堿合成能力的表達載體，其特征在于：含有如權(quán)利要求5或6所述的核苷酸。
8.提高托品烷生物堿含量的方法，其特征在于：構(gòu)建含有托品酮生物合成融合蛋白基因的表達載體，然后將表達載體在宿主細胞中表達，表達的融合蛋白作為托品酮的代謝區(qū)室，提高托品酮含量，然后提高下游托品烷生物堿含量，所述托品酮生物合成融合蛋白由III型聚酮合酶PYKS和托品酮合成酶CYP82M3通過連接肽連接，所述III型聚酮合酶PYKS位于連接肽的羧基端，所述托品酮合成酶CYP82M3位于連接肽的氨基端；所述III型聚酮合酶PYKS的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述托品酮合成酶CYP82M3的核苷酸序列如SEQ IDNO.6所示。
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