[發(fā)明專利]生物樣品中小分子物質(zhì)檢測的前處理試劑

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110572013.6
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113419017A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 耿瑞;蔡克亞;劉亞娟;趙高嶺;張學(xué)東;孫江彥;高培麗;李賓賓;申業(yè)明
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/72
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

1.生物樣品中小分子物質(zhì)檢測的前處理試劑，其包括：磁珠懸液、活化液、重懸液、清洗液和洗脫液；

所述磁珠懸液中磁珠為表面修飾十八烷基的磁珠；

所述活化液為三氯乙酸的水溶液；

所述洗脫液為甲酸、甲醇和水的混合液；

所述重懸液為水，

所述清洗液為水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前處理試劑，其特征在于，所述磁珠懸液中溶液為純化水，其中磁珠的密度為10mg/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前處理試劑，其特征在于，所述活化液中三氯乙酸的體積分?jǐn)?shù)為0.1％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前處理試劑，其特征在于，所述洗脫液中，甲酸、甲醇和水的體積比為0.1:90:10。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的前處理試劑，其特征在于，其中還包括解離劑，所述解離劑中包括：1.5g/L十二烷基磺酸鈉、100g/L二甲基亞砜、50g/L乙醇、0.05M/L Tris-HCl。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的前處理試劑，其特征在于，其中還包括內(nèi)標(biāo)溶液，所述內(nèi)標(biāo)溶液為小分子物質(zhì)的溶液，所述小分子物質(zhì)包括泊沙康唑、25-羥基維生素D2、25-羥基維生素D3、維生素A、維生素E和/或免疫抑制劑；所述免疫抑制劑為他克莫司、西羅莫司、依維莫司、環(huán)孢霉素A、子囊霉素、西羅莫司-d₃、依維莫司-d₄和/或環(huán)孢霉素A-d₁₂。

7.生物樣品中小分子物質(zhì)檢測的前處理方法，其特征在于，以權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的前處理試劑對生物樣品進(jìn)行處理。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的前處理方法，其特征在于，所述生物樣品為血液；所述小分子物質(zhì)為泊沙康唑、25-羥基維生素D2、25-羥基維生素D3、維生素A、維生素E和/或免疫抑制劑；所述免疫抑制劑為他克莫司、西羅莫司、依維莫司、環(huán)孢霉素A、子囊霉素、西羅莫司-d₃、依維莫司-d₄和/或環(huán)孢霉素A-d₁₂。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的前處理方法，其特征在于，包括：

將所述磁珠以所述活化液活化后，以超純水重懸，得到磁珠工作液；

將血液與所述磁珠工作液混合，孵育后分離磁珠；

磁珠經(jīng)超純水清洗后，以洗脫液洗脫，然后取上清液；

所述磁珠工作液中.0.，磁珠的密度為10mg/mL；

所述血液與磁珠工作液的體積比為(10～100):100；

所述孵育為室溫孵育2～5min；

所述磁珠與洗脫液的質(zhì)量-體積比為1mg:100μL。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的前處理方法，其特征在于，還包括

血液與磁珠混合前，將血液以所述解析劑進(jìn)行解析；

所述血液與解析劑的體積比為1:2；所述解析的條件為37℃，30min。

11.一種血液中小分子物質(zhì)的檢測方法，其特征在于，包括：

以權(quán)利要求6～9任一項(xiàng)所述的前處理方法對血液進(jìn)行處理后，以LC-MS/MS的液相色譜進(jìn)行檢測。