[發明專利]鑒定或輔助鑒定淡水魚類物種的PCR引物、試劑或試劑盒和鑒定方法

在審

• 申請號: 202110572002.8
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113564262A
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 胡文靜;蘇超群;張真;劉其根;胡忠軍
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學;信陽農林學院
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 張潔

1.鑒定或輔助鑒定淡水魚類物種的PCR引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列為序列表中的SEQ ID NO.1。

2.根據權利要求1所述的PCR引物，其特征在于，所述PCR引物用于魚類線粒體DNA序列的eDNA代謝編碼。

3.鑒定或輔助鑒定淡水魚類物種的試劑或試劑盒，其特征在于，含有權利要求1所述的PCR引物。

4.使用權利要求1所述的PCR引物或權利要求3所述的試劑或試劑盒鑒定或輔助鑒定淡水魚類物種的方法，其特征在于，所述方法為使用權利要求1所述的PCR引物對待測水體樣品進行PCR擴增，擴增產物進行測序，對測序所得的序列進行校正或編輯后提交數據庫進行比對，依據DNA序列相似率即可鑒定水體樣品的魚類物種。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，擴增體系以25μL計，包括以下組分：2.5μL10×ExTaq Buffer(Mg²⁺Plus)(20mM)，2μL dNTP Mixture(各2.5mM)，上下游引物各1μL(10μmol/L)，0.2μL TaKaRa TaqHS，2μL DNA模板，16.3μL ddH₂O。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，擴增程序為：94℃預變性3min；94℃變性30s，60.3℃退火40s，72℃延伸1min，35個循環；71℃后延伸10min。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述擴增程序中，權利要求1所述的PCR引物的最適退火溫度為60.3℃。