[發明專利]膜保護磁固相萃取-高效液相色譜檢測牛奶中的雌激素

有效

• 申請號: 202110571457.8
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113295796B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 楊成;莫正蓮;沈曉芳;龐月紅
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 彭素琴

本發明公開了膜保護磁固相萃取?高效液相色譜檢測牛奶中的雌激素，屬于檢測分析領域。本發明利用在磁性Fe₃O₄納米球表面原位生長亞胺類共價有機骨架COF?LZU1，制備得到磁性復合材料Fe₃O₄@COF?LZU1。本發明將其用作為吸附劑用于膜保護磁固相萃取三種雌激素，通過在特定單體濃度、萃和洗脫條件下對樣品進行處理，與HPLC?FLD聯用檢測，建立了E1、E2、E3的分析方法。本發明檢測方法的樣品處理無需有機溶劑，操作簡單，吸附劑用量少，可應用于食品樣品中E1、E2、E3的富集檢測，檢測的線性范圍寬(0.1～800μg/L)、檢出限低(0.01～0.15μg/L)、重復性和重現性好，具有非常好的應用前景。

技術領域

本發明具體涉及膜保護磁固相萃取-高效液相色譜檢測牛奶中的雌激素，屬于檢測分析領域。

背景技術

雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)是三種典型的內源性雌激素，可由人體及動物自身分泌。這些物質具有促進和維持女性正常生理特征以及促進動物生長、提高日增重量、提高飼料效率等作用。然而，過量的攝入會導致生殖功能障礙、惡性腫瘤、自身免疫性疾病和性早熟等許多其他疾病。有研究表明，畜牧業等非法濫用雌激素會在動物體內積累，從而進入到食物鏈，危害人類健康。因此，有必要開發食品樣品中雌激素的快速、準確檢測方法，以便雌激素殘留實施有效監控。

E1、E2、E3在食品中的含量通常較低，尤其是牛奶樣品，因其基質較為復雜，因此在分析之前，通常使用各種預處理技術對樣品中的分析物進行富集。傳統的樣品預富集方法選擇性差，回收率低，難以準確分離和檢測牛奶樣品中的雌激素。因此，開發吸附性能好、穩定性高的準確分離和檢測多種雌激素的方法具有重要意義。

發明內容

本發明通過原位生長策略制備磁性Fe₃O₄@COF-LZU1，用其作為吸附劑，建立了膜保護MSPE法用于萃取牛奶中的痕量雌激素(E1、E2、E3)，并與HPLC-FLD聯用檢測。所制備的復合材料不但具有COF-LZU1的優異特性，還具有與溶液分離操作簡單、快速的特點。此外，利用膜保護技術減少了牛奶樣品預處理步驟，無需有機溶劑便能進行萃取，這為復雜基質食品樣品中痕量物質的分析提供了一種簡單且綠色環保的方法。

本發明的第一個目的是提供一種用于吸附雌激素的磁性吸附材料，所述材料的制備方法包括如下步驟：

(1)制備氨基修飾的Fe₃O₄粒子：將鐵鹽分散在乙二醇中，然后加入乙酸鈉，溶解混勻后，再加入乙二胺進行反應，反應結束后獲得透明溶液；將該透明溶液置于反應容器中，在180-220℃下進行溶劑熱反應，反應結束后，冷卻，并通過外加磁場進行固液分離，收集固體，即得氨基修飾的Fe₃O₄粒子，記作Fe₃O₄-NH₂；

(2)將所得氨基修飾的Fe₃O₄粒子分散在二氧六環中，配制得到分散液A；將1,3,5-三甲醛基苯(TFB)分散在在二氧六環中，配制得到分散液B；將分散液B加入到分散液A中，獲得混合液C，然后滴加乙酸溶液，滴加結束后，置于100-120℃下進行反應；反應結束后，獲得初步反應液；

(3)將對苯二胺、1,3,5-三甲醛基苯分散二氧六環中，配制得到分散液D；然后將分散液D加入到初步反應液中，再滴加乙酸溶液，混勻，在100-120℃下進行反應；反應結束后，通過外加磁場進行固液分離，收集固體，即得磁性吸附材料，記作Fe₃O₄@COF-LZU1。

在本發明的一種實施方式中，步驟(1)中鐵鹽包括氯化鐵或其水合物；具體可選FeCl₃·6H₂O。