[發(fā)明專(zhuān)利]一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110566729.5
• 申請(qǐng)日: 2021-05-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113293136B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬(wàn)謙;彭文珍;王銳峰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都新生命霍普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/09
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/09
• 代理公司: 成都行之專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 51220
• 代理人: 唐邦英

1.一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將存儲(chǔ)有待復(fù)蘇細(xì)胞的凍存管進(jìn)行解凍融化得到細(xì)胞液體；

S2、向步驟S1中獲得的細(xì)胞液體中加入PBS，混勻獲得細(xì)胞混合溶液，所述PBS與細(xì)胞液體的體積比為4:1；

S3、將混勻后的細(xì)胞混合溶液加入六孔板的其中一孔中，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置5-6分鐘，吸棄上清液；

S4、向吸干上清液的孔中加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，所述培養(yǎng)液與加入孔中的細(xì)胞混合溶液中細(xì)胞液體的體積比為5:1；

步驟S1中所述待復(fù)蘇細(xì)胞為Hela細(xì)胞；

步驟S4中所述培養(yǎng)液的配方為：

DMEM高糖培養(yǎng)基+10%胎牛血清+100?U/ml青霉素+100?μg/ml鏈霉素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法，其特征在于，所述細(xì)胞液體的體積為1ml，PBS和培養(yǎng)液的體積分別為4ml和5ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法，其特征在于，步驟S1中所述解凍融化的條件為37℃水浴。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法，其特征在于，步驟S3中采用移液器輕輕吸棄上清液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法，其特征在于，步驟S4中的培養(yǎng)條件為：37℃，5%二氧化碳。

6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的一種復(fù)蘇細(xì)胞的方法在細(xì)胞復(fù)蘇中的應(yīng)用，細(xì)胞包括Hela細(xì)胞。