[發(fā)明專利]一種全禽源H5N2亞型禽流感重組毒株、疫苗及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110564078.6 | 申請日： | 2021-05-24 |
| 公開（公告）號： | CN113025583B | 公開（公告）日： | 2021-09-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 亓文寶;廖明;陳意群;張家豪;李波;黃錦瑜;李華楠 | 申請（專利權(quán)）人： | 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N15/85;C12N15/44;A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102 | 代理人： | 趙崇楊 |
| 地址： | 510642 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 全禽源 h5n2 禽流感 重組 疫苗 及其 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了一種全禽源H5N2亞型禽流感重組毒株、疫苗制備方法、疫苗組合物和應(yīng)用。所述重組毒株由高致病性H5N6亞型禽流感流行毒株改造后的HA基因與H5N2亞型禽流感D7株的七個內(nèi)部基因PB2、PB1、PA、NP、NA、M和NS構(gòu)成；所述改造后的HA基因序列如SEQ ID NO：9所示；所述D7株的七個內(nèi)部基因PB2、PB1、PA、NP、NA、M和NS的核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1～3、5～8所示。所述重組病毒是以D7系統(tǒng)為骨架拯救出的重組禽流感病毒，為無致病力毒株，且能保持原來的免疫原性，可在雞胚培養(yǎng)過程中保持較高的病毒滴度，完全滿足生物安全性要求，具有較大的應(yīng)用前景。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及反向遺傳學(xué)技術(shù)和動物疫苗技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種全禽源H5N2亞型禽流感重組毒株、疫苗制備方法、疫苗組合物和應(yīng)用。
背景技術(shù)
禽流感（Avian influenza，AI）是由禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）引起的一種感染和/或疾病綜合征，嚴(yán)重影響家禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展并威脅人類健康，家禽感染后可表現(xiàn)出不同的臨床癥狀，根據(jù)致病性不同可將其分為低致病性禽流感（Low pathogenicavian influenza，LPAI）和高致病性禽流感（Highly pathogenic avian influenza，HPAI）。H5亞型高致病性禽流感自2003年以來一直在中國以及世界各地區(qū)發(fā)生流行甚至暴發(fā)疫情；自2016年以來，我國H5亞型高致病性禽流感疫情數(shù)量明顯增多，而H5N6已成為影響我國養(yǎng)禽業(yè)最主要的血清型。迄今為止，WHO已報道國內(nèi)經(jīng)實驗室確診的人感染甲型H5N6流感病毒病例共24例（https://apps.who.int/iris/handle/10665/330697）。因此H5亞型禽流感病毒的防控對養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展和公共衛(wèi)生安全均有重要意義。
滅活疫苗是我國控制H5亞型禽流感的有效措施之一，禽流感滅活疫苗對免疫效果起決定作用的是HA蛋白；但在疫苗、藥物和病毒自身的壓力下，H5亞型禽流感病毒的HA基因進(jìn)化速度非常快，現(xiàn)有的疫苗已經(jīng)無法有效地對新型H5亞型分支的禽流感病毒進(jìn)行防控。面對禽流感病毒的不斷進(jìn)化，H5亞型禽流感疫苗需要及時更新，以滿足對當(dāng)前流行的H5亞型禽流感病毒的防控。為了滿足滅活疫苗的快速大規(guī)模生產(chǎn)需求，需具有以下條件：一、篩選當(dāng)前合適的H5亞型禽流感流行病毒株制備成疫苗種毒；二、疫苗種毒需要保持低致病性甚至無致病性，且保持原來的免疫原性；三、種毒在雞胚中培養(yǎng)能保持較高的病毒滴度。
目前，利用反向遺傳學(xué)技術(shù)構(gòu)建禽流感疫苗種毒是常用的技術(shù)手段，該技術(shù)在體外對病毒基因進(jìn)行改造，拯救出生產(chǎn)所需的毒株，滿足滅活疫苗的快速大規(guī)模生產(chǎn)。在人用流感疫苗中，通過選擇利用人流感疫苗骨架來構(gòu)建重組禽流感疫苗（例如：Hoffmann E,Krauss S, Perez D et al. Eight-plasmid system forrapid generation ofinfluenza virus vaccines.
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷和不足，提供一種全禽源H5N2亞型禽流感重組毒株。
本發(fā)明的第二個目的在于提供所述全禽源H5N2亞型禽流感疫苗的制備方法。
本發(fā)明的第三個目的在于提供所述全禽源H5N2亞型禽流感疫苗的應(yīng)用。
本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案給予實現(xiàn)的：
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