[發明專利]一種用于三種分子間結合作用解析的熒光三元相關光譜系統

有效

• 申請號: 202110563055.3
• 申請日: 2021-05-21
• 公開（公告）號: CN113295662B
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 董朝青;任吉存
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 河南大象律師事務所 41129
• 代理人: 王映樸

1.一種用于三種分子間結合作用解析的熒光三元相關光譜系統，其特征在于：

所述熒光三元相關光譜系統包括至少三個輸出不同波長的激發光源，激發光源同軸發射的激光束照明樣品激發產生的熒光信號，熒光信號由多組二色鏡根據熒光波長分成多路信號，分別傳導至對應的單光子探測器進行信號探測，信號傳輸至與對應單光子探測器相連的信號采集卡和運算卡，并進行三元相關函數實時運算，獲得熒光三元相關光譜曲線；

所述激發光源至少包括三個輸出波長分別為488nm、561nm和640nm激光束的激光器；

三個激光束產生的熒光強度波動信號(I₂(t)，I₃(t)和I₄(t))使用下面三元相關函數進行實時運算，獲得三元相關光譜曲線，

對獲得的三元相關光譜曲線采用以下模型獲得G(0，0)和τ_D參數，

其中，τ1和τ2為561nm和640nm檢測通道與488nm檢測通道相關時的延遲時間；τ_D為三種分子復合物的平均擴散時間，ω為激光聚焦重疊區的橫向半徑，N為在三束激光束形成的聚焦重疊區內存在的三種分子復合物的平均數目，三元相關光譜曲線的振幅G(0，0)值與形成的分子復合物數目N值成反比例關系，其值越小，N值越大，反映形成的分子復合物數目越多，說明三種分子間的結合作用力越強。

2.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：所述激發光源包括多個激光器，激光器經二色鏡或反射鏡處理后通過準直耦合器從同一根單模光纖輸出。

3.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：激發光源發射的激光束依次經過準直擴束鏡、二色鏡、掃描振鏡、掃描鏡頭和筒鏡調節后進入物鏡激發樣品。

4.根據權利要求3所述的系統，其特征在于：激發產生的熒光信號經物鏡匯聚后，經過反射鏡、筒鏡、掃描鏡頭、掃描振鏡后，經過濾除激發光的二色鏡后再分成多路信號；

濾除激發光的二色鏡和根據熒光波長分成多路信號的二色鏡之間設有一聚光透鏡。

5.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：樣品的熒光信號由至少三個二色鏡按照光譜波長分成至少四個檢測光路。

6.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：檢測光路的熒光信號均由對應的聚光透鏡匯聚到對應的光纖頭，再由對應的多模光纖傳輸到對應的單光子探測器。

7.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：信號采集卡和運算卡與單光子探測器相連接，實時進行三元相關函數運算和實時獲得其中三路熒光信號的三元相關光譜曲線。

8.根據權利要求1所述的系統，其特征在于：信號采集卡和運算卡與掃描振鏡相連接。