[發明專利]一種用于檢測新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）抗原的試劑卡盒及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110559470.1
• 申請日: 2021-05-21
• 公開（公告）號: CN113447652A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 陳真誠;聶曉寧;髙忠華
• 申請（專利權）人: 四川高潤德生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;C07K16/10;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/22
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 于鵬

1.一種用于檢測新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原的試劑卡盒，其特征在于，包括試劑卡盒本體、設置在試劑卡盒本體內部的檢測條(9)、稀釋液及使用說明書。

2.根據權利要求1所述一種用于檢測新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原的試劑卡盒，其特征在于：所述試劑卡盒本體包括下盒體(6)，所述下盒體(6)的上表面固定連接有定位臺(8)，所述下盒體(6)的上表面固定連接有凸臺(10)，所述凸臺(10)的上表面固定連接有檢測條(9)，所述下盒體(6)上表面的兩側均固定連接有定位柱(7)，所述定位柱(7)的內壁固定連接有定位桿(19)，所述定位桿(19)的上表面固定連接有上盒體(1)，所述上盒體(1)上表面的一側開設有凹槽(2)，所述上盒體(1)上表面的中部開設有觀察窗口(3)，所述上盒體(1)上表面的另一側開設有透氣孔(4)，所述上盒體(1)與下盒體(6)的正面和背面均固定連接有防滑墊(5)。

3.根據權利要求1所述一種用于檢測新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原的試劑卡盒，其特征在于所述檢測條(9)包括PVC底板(11)，所述PVC底板(11)上由前到后依次設置有樣品墊(12)、膠體金墊(13)、包被墊(14)和吸水墊(18)，所述包被墊(14)為硝酸纖維素膜，在包被墊(14)上設置有兩條測試線，分別是G線(15)和M線(20)和一條質控線C線的硝酸纖維素膜，G線(15)固定有抗人IgG單抗，用于檢測新型冠狀病毒IgG抗體，M線(20)固定有抗人IgM單抗，用于檢測新型冠狀病毒IgM抗體；C線固定有質控抗體。

4.一種用于檢測新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)抗原的試劑卡盒的制備方法，

其特征在于，包括以下步驟：

S1，膠體金溶液的制備，包括：

S11)氯化金HauCl4水溶液的配制：將l g的氯化金一次溶解于去離子水中配成1％的水溶液；

S12)煮金取200mL去離子水加入到500mL三角瓶中，置于磁力攪拌器上，打開攪拌旋鈕至適當速度，用移液器吸取2mL 1％氯金酸溶液于所述200mL去離子水中，攪拌1min，加熱至沸騰，1％檸檬酸三鈉溶液3.6mL，溶液在2min內由灰色變黑色最后變為紅色，再繼續加熱攪拌10min，關掉加熱旋鈕，適當速度攪拌至室溫，定容至200mL，4℃保存，獲得膠體金溶液；

S13)試劑必須保證嚴格的滅菌或過濾，除去可能混有的雜質；

S14)配置膠體金溶液的為PH7.0-7.5，否則缺乏重復性；

S15)氯金酸極易吸潮，對金屬有強烈的腐蝕性，不能使用金屬藥匙，避免接觸天平秤盤；

S16)金顆粒容易吸附在電極使之堵塞，不能使用PH電極測定金溶液的PH值；

S2，檢測條(9)核心部件的準備，具體操作步驟如下：

S21.制作樣品墊；

S22.制作載有抗體的玻璃纖維素膜條或聚酯膜條，這是膠體金墊；

S23.制作合適觀察窗口(3)孔徑的硝酸纖維素膜條，所述硝酸纖維素膜條噴涂有顯示陽性結果的捕捉分析物的配體線，和陰性對照組線，這是測試線(9)所在的膜條，所述捕捉分析物是抗人IgG和IgM抗體，陰性對照組線是COIVD-19的多克隆抗體；

S24.制作吸水墊，

S25.將S21-S24中準備的四部分銜接固定在不干擾免疫反應和流速的簿塑料背板上；

S3，膠體金標記物的制備：在電磁攪拌器下降1/10體積的時候，將抗原加于膠體金溶液，反應一定時間后加入BSA并調整至pH8.0，放置至室溫繼續反應，封閉多余的游離膠體金，穩定膠體金標記物；

S4，NC膜處理：NC膜上預先包被上測試線(15)和質控線(16)，測試線(15)能夠與膠體金標記物發生免疫反應相結合，使膠體金在測試線(15)發生聚集，根據測試線(15)的顯色狀況判讀結果；

S5，將膠體金標記物噴涂在玻璃纖維素上，在干燥間或烘箱中37℃將其烘干；將樣品墊處理液浸涂在玻璃纖維素膜上，在干燥間或烘箱中37℃將其烘干，得到膠體金墊；

S6，印模制備：將硝酸纖維素膜NC膜貼在PVC底板上，將印模機的C、T線調整搭配合適的距離，然后進行印模，最后將印好的膜放在干燥間或烘箱中37℃將其烘干；

S7，組板：將吸水墊和制備好的金墊、樣品墊裁切至合適的寬度，與印好C、T線的硝酸纖維素膜貼在PVC板的位置；

S8，切條：根據檢測卡卡槽的寬度，將組裝好的大板裁切成一定寬度的檢測條(9)，裁切寬度均一，無壓痕，無劃傷；

S9，包裝：將裁切好的檢測條壓入試劑卡盒本體內，得到一種用于檢測新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)抗原的試劑卡盒。