[發(fā)明專利]一種應(yīng)用酶促反應(yīng)測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110558911.6
• 申請(qǐng)日: 2021-05-21
• 公開（公告）號(hào): CN113203614B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈曉晨;王珂清;吳洋;秦艷華;張合川;朱懷遠(yuǎn);王瑞;殷瑜東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N21/31
• 代理公司: 浙江千克知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 裴金華

本發(fā)明公開了一種應(yīng)用酶促反應(yīng)測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的方法，包括以下步驟：S1、將再造煙葉磨成煙末，干燥至恒重備用；S2、稱取步驟S1中準(zhǔn)備的煙末置于反應(yīng)器中，加入去離子水，再加入碳酸酐酶，然后通入CO₂進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)完成后封閉反應(yīng)器，置于冰浴中振蕩，然后過(guò)濾，得到待測(cè)液；S3、將待測(cè)液用冰水稀釋后采用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)量Ca²⁺的吸光度，然后帶入標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得出待測(cè)液中Ca²⁺的濃度C；S4、計(jì)算空白樣品中Ca²⁺濃度C₀；S5、按公式計(jì)算再造煙葉中碳酸鈣的含量。該方法向再造煙葉的水提取液中通入CO₂，不僅能夠?qū)⒛繕?biāo)物碳酸鈣變成碳酸氫鈣提取出來(lái)，同時(shí)可以避免再造煙葉中其它鈣鹽的溶出，提取準(zhǔn)確度高，可靠性強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及再造煙葉中碳酸鈣含量分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種應(yīng)用酶促反應(yīng)測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的方法。

背景技術(shù)

再造煙葉(Reconstituted Tobacco)是利用煙末、煙梗、碎煙片等煙草物質(zhì)為原料制成片狀或絲狀的再生產(chǎn)品，用作卷煙填充料。在卷煙中加入造紙法再造煙葉，不僅可以充分利用煙葉資源，降低生產(chǎn)成本，還能有效降低卷煙焦油量，是提高卷煙安全性的有效途徑。造紙法再造煙葉生產(chǎn)過(guò)程主要包括萃取、濃縮、制漿、抄造和涂布、干燥等主要工藝，生產(chǎn)中通常添加一定量的碳酸鈣以提高灰分含量，以提高其物理性能，如吸液性能、外觀性能等。因此準(zhǔn)確快速測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的含量，便于評(píng)價(jià)其產(chǎn)品外觀、煙氣情況等。目前測(cè)定碳酸鈣的主要方法有絡(luò)合滴定法、電位滴定法、連續(xù)流動(dòng)法和離子色譜法。其中，絡(luò)合滴定法和電位滴定法的測(cè)定過(guò)程繁瑣，容易引入人為誤差；離子色譜法和連續(xù)流動(dòng)法均是測(cè)定酸溶性總鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，而再造煙葉中鈣元素以多種形態(tài)共存（水溶性無(wú)機(jī)鈣、有機(jī)酸鈣、磷酸鈣、草酸鈣和碳酸鈣），不同形態(tài)的鈣在酸溶液中有時(shí)會(huì)共溶出，所以這兩種方法無(wú)法準(zhǔn)確反映樣品中碳酸鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

中國(guó)專利【CN102830174A】公開了一種快速鑒別造紙法再造煙葉碳酸鈣含量的方法，將再造煙葉固定在裝有酸溶液的樣品槽中，樣品槽的一側(cè)裝有超聲波發(fā)射器，另一側(cè)裝有超聲波接收器，使超聲波發(fā)射器發(fā)射的超聲波穿過(guò)再造煙葉，并被超聲波接收器接收，通過(guò)檢測(cè)超聲波接收器接收的信號(hào)衰減值，即可鑒別再造煙葉中碳酸鈣含量高低。該方法的問(wèn)題在于不能準(zhǔn)確的得到碳酸鈣的具體含量，而且沒有考慮煙草本身所含有的碳酸根影響。

中國(guó)專利【CN102901791A】公開了一種再造煙葉中碳酸鈣含量的測(cè)定方法，先用過(guò)量的乙酸溶液萃取再造煙葉，利用現(xiàn)代分析方法測(cè)定其總鈣離子含量，然后在同樣條件下，分析去離子水萃取的再造煙葉中游離鈣離子含量，利用兩者的差值計(jì)算再造煙葉中碳酸鈣含量。該方法的問(wèn)題在于再造煙葉中含有大量的不溶于水但溶于乙酸的果膠酸鈣，測(cè)定結(jié)果將果膠酸鈣中的鈣計(jì)算為碳酸鈣，使得測(cè)定結(jié)果偏高。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種應(yīng)用酶促反應(yīng)測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的方法，該方法向再造煙葉的水提取液中加入碳酸酐酶，再通入CO₂，置于冰浴中振蕩，使其與碳酸鈣反應(yīng)生成可溶性的碳酸氫鈣，過(guò)濾稀釋，采用原子吸收法測(cè)定其Ca²⁺的吸光度，帶入標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得出Ca²⁺的濃度，然后通過(guò)公式計(jì)算得出Ca²⁺的含量。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：一種應(yīng)用酶促反應(yīng)測(cè)定再造煙葉中碳酸鈣的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將再造煙葉磨成煙末，干燥至恒重備用；

S2、稱取步驟S1中準(zhǔn)備的煙末置于反應(yīng)器中，加入去離子水，再加入碳酸酐酶，然后通入CO₂進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)完成后封閉反應(yīng)器，置于冰浴中振蕩，然后過(guò)濾，得到待測(cè)液；

S3、將步驟S2得到的待測(cè)液用冰水稀釋后采用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)量Ca²⁺的吸光度，然后帶入標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得出待測(cè)液中Ca²⁺的濃度C；