[發(fā)明專利]利用基因工程菌和酵母耦合發(fā)酵大規(guī)模產(chǎn)CMP-唾液酸的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110553022.0 | 申請日： | 2021-05-20 |
| 公開（公告）號： | CN113881737A | 公開（公告）日： | 2022-01-04 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張洪濤;游星;周文;黎玉;詹曉北 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12P19/26 | 分類號： | C12P19/26;C12P39/00;C12N1/19;C12R1/865;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/645 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權代理有限公司 23211 | 代理人： | 趙巧娜 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 基因工程 酵母 耦合 發(fā)酵 大規(guī)模 cmp 唾液酸 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)CMP-Neu5Ac的方法，其特征在于，利用表達CMP-唾液酸合成酶的基因工程菌株和酵母耦合發(fā)酵合成CMP-Neu5Ac。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述CMP-唾液酸合成酶來源于Neisseriameningitidis M0579、Neisseria meningitidis strain M22819、Pasteurella multocidaATCC43137、Haemophillus ducreyi 35000HP。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述酵母包括啤酒酵母、釀酒酵母和面包酵母；所述基因工程菌宿主為大腸桿菌、枯草芽孢桿菌或酵母菌。
4.根據(jù)權利要求1～3任一項所述的方法，其特征在于，將基因工程菌和酵母分別培養(yǎng)并收集菌體細胞，將菌體細胞加入含有CMP和Neu5Ac的反應體系中。
5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，基因工程菌和酵母的添加比例為(1:3)-(3:1)；所述基因工程菌的添加量為50～100g/L。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述啤酒酵母已于2021年5月12日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No:61663。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于，反應體系中的CMP和Neu5Ac濃度分別為70-90mM和40-60mM。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，反應體系中還含有10-40mM的Mg2+。
9.根據(jù)權利要求8所述的方法，其特征在于，在25-35℃、150-250r/min下反應3～5h。
10.一株啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，已于2021年5月12日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No:61663。
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