[發明專利]一種用于膀胱修復的復合支架材料及其制備方法

在審

• 申請號: 202110551787.0
• 申請日: 2021-05-20
• 公開（公告）號: CN113398336A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 陳果;劉月白;楊羅;馮德超;唐偲
• 申請（專利權）人: 四川大學華西第四醫院
• 主分類號: A61L27/54
• 分類號: A61L27/54;A61L27/50;A61L27/24;A61L27/18;D01D5/00
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 張國棟

1.一種用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，所述用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法包括以下步驟：

步驟一，進行功能膠原支架材料的制備：利用膠原膜纏繞模具，得到纏繞膠原膜的模具；在所述纏繞膠原膜的模具上用含有膠原的液體涂裹，取出所述模具，得到所述膠原管；利用神經絲包被所述膠原管，即可制備得到所述功能膠原支架材料，備用；

步驟二，進行復合電紡絲纖維的制備：將聚(3-羥基丁酸酯-4-羥基丁酸酯)共聚物粉末溶于二氯甲烷和二甲基甲酰胺的復合溶劑中，均勻攪拌溶解，隨后加入左旋聚乳酸，磁力攪拌，得到電紡絲纖維溶液；稱取表柔比星，加入所述電紡絲纖維溶液中，繼續磁力攪拌至表柔比星完全溶解，得到復合電紡絲纖維混合溶液；將所述復合電紡絲纖維混合溶液加入至注射器中進行靜電紡絲，收集電紡絲，洗滌，冷凍干燥，即可得到所述復合電紡絲纖維，備用；

所述進行靜電紡絲包括：

用注射器抽取溶解好的復合電紡絲纖維混合溶液，固定在恒流泵上；將高壓靜電發生器的正極接到針頭上，負極連接到接收板上，接收板上鋪有一層鋁箔紙，用于接收靜電紡纖維，開始靜電紡絲；每次紡絲2h，紡絲完成后，將鋁箔紙取下，即可收集電紡絲；

步驟三，進行葡聚糖-殼聚糖-VEGF緩釋微球的制備：將1～10mg/ml的rhVEGF168溶液與2～4％w/v的葡聚糖水溶液攪拌，得混合溶液；將1～2.5ml 0.1％w/v的殼聚糖溶液逐步滴加于混合溶液中，攪拌均勻；加入60～95μl的硫酸鋅，攪拌20～30min，采用3～5％的甘露醇孵育，離心并重懸，即可得到所述葡聚糖-殼聚糖-VEGF緩釋微球，備用；

所述離心并重懸包括：

將混合液收集到無菌的離心容器中；將離心容器放入到離心設備中進行離心；棄去離心后混懸液的上層液體，加入適量的懸浮介質，令沉淀層重新懸浮于懸浮介質中；將沉淀層在懸浮介質中分散均勻；利用移液槍重復吸吹法、振蕩器分散法或者手動振打方式將混合液體分散均勻后，即可得所述葡聚糖-殼聚糖-VEGF緩釋微球；

步驟四，進行復合支架材料的制備：按照質量份數稱取原料；將功能膠原支架材料、可降解高分子材料、復合電紡絲纖維和生長因子依次按照不同梯度浸入重懸的不同孔徑的所述葡聚糖-殼聚糖-VEGF緩釋微球溶液中，于10～12℃的條件下靜置10～12h；完成梯度浸漬處理后，將混合微球溶液置于50℃的條件下干燥處理30～50min，即可制備得到所述用于膀胱修復的復合支架材料。

2.如權利要求1所述的用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，步驟二中，所述磁力攪拌的條件為：利用磁力攪拌器攪拌溶解2～4h，溶解溫度為55～65℃。

3.如權利要求1所述的用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，步驟二中，所述聚(3-羥基丁酸酯-4-羥基丁酸酯)和左旋聚乳酸的質量配比為1：0.6～1.2，所述表柔比星與聚(3-羥基丁酸酯-4-羥基丁酸酯的質量比為0.8～1.2：5。

4.如權利要求1所述的用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，步驟二中，所述靜電紡絲的條件為：將注射器用針頭噴嘴固定，在30～65℃下設置針頭與接收器之間距離為15～20cm，電壓為5～30kv，所述注射器的推進速度為0.1～12.5ml/h。

5.如權利要求1所述的用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，步驟三中，所述rhVEGF168溶液與葡聚糖水溶液的攪拌速率為700～900rpm/min，攪拌時間為20～30min。

6.如權利要求1所述的用于膀胱修復的復合支架材料的制備方法，其特征在于，步驟四中，所述按照質量份數稱取原料包括：按照質量份數計，稱取功能膠原支架材料30～50份、可降解高分子材料20～30份、復合電紡絲纖維15～30份、生長因子8～15份、葡聚糖6～12份、rhVEGF168溶液5～10份、殼聚糖4～8份、硫酸鋅3～5份、甘露醇2～4份以及滅菌去離子水。