[發明專利]初步推斷死因的方法以及檢測內源性代謝產物的方法

有效

• 申請號: 202110542429.3
• 申請日: 2021-05-18
• 公開（公告）號: CN113237975B
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: 文迪;馬春玲;白銳;謝冰
• 申請（專利權）人: 河北醫科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86;G16B40/10
• 代理公司: 河北國維致遠知識產權代理有限公司 13137
• 代理人: 任青

1.一種非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，包括以下步驟：

檢測不同致死原因血液樣本中乙酰肉堿、丙酰肉堿、琥珀酸的含量；

根據所述乙酰肉堿、丙酰肉堿、琥珀酸的絕對含量構建二分類特征的參考標準庫；

檢測待測血液樣本中乙酰肉堿、丙酰肉堿、琥珀酸的絕對含量，帶入所述參考標準庫，對所述血液樣本的主體進行抗精神病藥物致死的初步推斷。

2.根據權利要求1所述的非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，檢測不同致死原因血液樣本中乙酰肉堿、丙酰肉堿、琥珀酸的含量的操作包括以下步驟：

向待測的血液樣本中加入抗凝劑，在4℃以3000-5000r/min離心5-10min，得到第一上清液；將所述第一上清液以12000r/min離心5-10min，得到第二上清液；向所述第二上清液中加入相當于所述第二上清液3倍體積的色譜純甲醇混勻，超聲，于-20℃靜置15-20min，再以不低于12000r/min的轉速下離心10-15min，得到第三上清液；將所述第三上清液干燥，加入相當于所述第三上清液5倍體積的超純水復溶，最后以0.22μm生物膜過濾，作為待測液；

用超高效液相色譜-質譜聯用技術對所述待測液中的所述內源性代謝產物進行檢測。

3.根據權利要求2所述的非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，通過氮吹處理將所述第三上清液進行干燥。

4.根據權利要求2所述的非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，在所述超高效液相色譜-質譜聯用技術中，色譜條件為：

色譜柱：超高壓T3色譜柱；

流動相A：0.1％的甲酸水溶液；流動相B：乙腈；

按以下程序進行梯度洗脫：

流速為0.3ml/min。

5.根據權利要求4所述的非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，色譜柱采用Waters的UPLC?HSS?T3色譜柱，規格為2.1mm×100mm，1.8μm。

6.根據權利要求2所述的非診斷目的的基于內源性代謝產物初步推斷死因的方法，其特征在于，在所述超高效液相色譜-質譜聯用技術中，質譜條件為：

采用HESI離子化方式；噴霧電壓：正極，3.0kV；負極，2.7kV；毛細管溫度320℃；鞘氣流速：30arb，輔助氣流速：15arb；掃描模式為Full?Scan/dd-MS2，采集范圍為m/z?70~1500，正負離子切換采集模式；分辨率采用MS?Full?Scan?35000FWHM，MS2：17500FWHM，NCE為12.5eV，25eV和37.5eV梯度模式。