[發明專利]用NK細胞上TIGIT和TIM-3確定乙肝相關肝癌預后的系統

有效

• 申請號: 202110541407.5
• 申請日: 2021-05-18
• 公開（公告）號: CN113267627B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 楊志云;于莉華;杜娟;劉曉利;江宇泳
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京地壇醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉

本發明提供了一種TIGIT和TIM?3作為生物標志物在判斷乙肝相關肝癌患者預后中的應用。所述TIGIT和TIM?3是所述患者NK細胞上的TIGIT和TIM?3，其在NK細胞上的表達可用于輔助預測乙肝相關肝癌患者的疾病進展和結局。此外，本發明為患者提供了新的治療靶點，為未來的乙肝相關肝癌免疫治療提供新的思路。

技術領域

本發明屬于肝癌診斷領域，具體地，本發明涉及乙肝相關肝癌進展的生物標志物及其在乙肝相關肝癌的預后中的應用。

背景技術

肝癌是一種常見的惡性腫瘤，根據2018年全球癌癥統計數據，肝癌的死亡率在全球癌癥中排名第四。乙肝病毒感染是肝癌的最主要原因，而乙肝相關肝癌(Hepatitis BVirus Related Hepatocellular Carcinoma，HBV-HCC)的高發病率和死亡率一直是這個領域的研究重點。

能夠在一定程度上反映腫瘤細胞惡性生物學行為的生物標志物，已經廣泛用于腫瘤或癌癥的早期檢測或診斷、進展監測、預后評估等，至少可以作為一種輔助評估手段，為臨床醫生和患者提供非常重要的診斷信息，從而幫助針對性地實現個體化的精準醫療。而就乙肝相關肝癌患者的疾病進展監測，目前本領域尚缺乏可靠、合適的生物標志物及其相關手段與方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何對乙肝相關肝癌患者的腫瘤進展和生存進行預后預測。

本發明的發明人從NK細胞上存在的多種共抑制分子中發現，T細胞免疫球蛋白和酪氨酸基抑制基域(TIGIT)與T細胞免疫球蛋白結構域和粘液蛋白結構蛋白3(TIM-3)的共表達與乙肝相關肝癌進展呈正相關，與患者的臨床預后不良有關。不受任何理論的限制，發現TIGIT和TIM-3協同介導乙肝相關肝癌患者NK細胞耗竭。

因此發現，乙肝相關肝癌患者的NK細胞上TIGIT和TIM-3可以作為一種生物標志物，二者在NK細胞上的(共)表達情況可以提供患者預后信息。基于上述發現，本發明提供以下技術方案。

一方面，本發明提供一種檢測TIGIT和TIM-3表達的試劑在制備用于判斷乙肝相關肝癌患者預后的產品中的應用。

在本發明的上下文中，術語“乙肝相關肝癌”是指既往已診斷為慢性乙型病毒性肝炎，同時根據2017年衛生部修訂的《原發性肝癌診療規范》的診斷標準執行診斷的癌癥。

優選地，所述TIGIT和TIM-3分別是所述患者NK細胞上的TIGIT和TIM-3。相應地，所述試劑檢測所述患者NK細胞上的TIGIT和TIM-3的表達。因此，優選地，所述應用包括檢測來自患者的樣本中NK細胞上的TIGIT和TIM-3表達。根據本發明的具體實施方式，所述樣本為血液，例如外周血。分離外周血中的單個核細胞，可以檢測其中的NK細胞上TIGIT和TIM-3表達，例如表達與否或表達量(表達水平)。

根據本發明的具體實施方式，所述試劑可以分別是特異性結合TIGIT的抗體或其片段和特異性結合TIM-3的抗體或其片段，例如單克隆抗體或其片段，所述片段保持了抗體與TIGIT或TIM-3的特異性結合能力。在本發明的上下文中，針對來自患者的樣本，所述試劑可以通過特異性結合細胞上TIGIT和TIM-3，檢測這兩種蛋白在細胞上的表達與否或表達量(表達水平)。

優選地，所述產品為檢測試劑盒。

另一方面，本發明提供一種用于判斷乙肝相關肝癌患者預后的系統，所述系統包括：

(1)樣本處理模塊，其設置為從所述患者獲得外周血單個核細胞；

(2)檢測模塊，其設置為針對通過樣本獲取模塊獲得的外周血單個核細胞，檢測其中NK細胞上TIGIT和TIM-3表達，得到TIGIT和TIM-3雙陽性NK細胞(TIGIT⁺TIM-3⁺NK細胞)的比例，所述比例為TIGIT和TIM-3均為陽性的NK細胞的數量占相對NK細胞的總數量的比例；和