[發(fā)明專利]一種銀杏葉提取中間體或其制劑中黃酮類成分指紋圖譜的建立方法及其建立的指紋圖譜

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110540716.0
• 申請(qǐng)日: 2021-05-18
• 公開（公告）號(hào): CN113252821B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 方同華;王春生;林珊;佟美鴻;劉玉成;姚洪艷;武志立;董麗麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司;哈爾濱珍寶制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京瑞恒信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382
• 代理人: 李琰

1.一種銀杏葉提取中間體和/或舒血寧注射液中黃酮類成分的指紋圖譜建立方法，具體的操作步驟包括：

1）參照物溶液的制備：取水仙苷對(duì)照品適量，精密稱定，加體積百分比濃度50%的甲醇水溶液適量，置70～80℃熱水浴至完全溶解，冷至室溫，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，稀釋至刻度，得到儲(chǔ)備液；精密吸取儲(chǔ)備液適量，加50%甲醇制成每1ml含水仙苷20μg的溶液，即得；

2）供試品溶液的制備：

銀杏葉提取中間體供試品的制備

取本品適量加水制備成每1ml含總黃酮醇苷1.0mg的溶液，精密量取所述溶液2.0?ml置10ml容量瓶中，用體積百分比濃度50%的甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；和/或

舒血寧注射液供試品的制備

精密量取本品2ml，?置10ml量瓶中，用體積百分比濃度50%的甲醇水溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

3）測(cè)定：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各1~2μl，注入高效液相色譜儀，根據(jù)以下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄25min內(nèi)的色譜圖，得到指紋圖譜：

色譜柱：Agilent?ZORBAX?SB-C18柱，規(guī)格3.0mm×150?mm，固定相粒徑1.8?μm；

流動(dòng)相：由A和B兩相組成，其中A相為乙腈，B相為體積百分比濃度0.1%的甲酸水溶液，流速0.25ml/min，0~25min按照如下程序進(jìn)行梯度洗脫：

0～12min，按照體積百分比，A?:?B?=18%?:?82%勻速地變化為A?:?B?=21%?:?79%，

12～15min，按照體積百分比，A?:?B?=21%?:?79%勻速地變化為A?:?B?=25%?:?75%，

15～25min，按照體積百分比，A?:?B?=25%?:?75%勻速地變化為A?:?B?=35%?:?65%；

理論塔板數(shù)按水仙苷峰計(jì)算不應(yīng)低于20000；

柱溫：35℃；

紫外檢測(cè)波長為360nm；

4）共有峰的標(biāo)定：以水仙苷吸收峰為參照峰，共有峰23個(gè)，相對(duì)保留時(shí)間為：

1號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.400±0.004，

2號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.446±0.007，

3號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.519±0.008，

4號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.538±0.009，

5號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.573±0.016，

6號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.644±0.007，

7號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.669±0.008，

8號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.689±0.010，

9號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.778±0.005，

10號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.874±0.006，

11號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間0.925±0.006，

12號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.000，

13號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.030±0.008，

14號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.093±0.013，

15號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.134±0.025，

16號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.180±0.024，

17號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.222±0.025，

18號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.255±0.015，

19號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.356±0.029，

20號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.553±0.064，

21號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.764±0.090，

22號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間1.805±0.110，

23號(hào)吸收峰：相對(duì)保留時(shí)間2.004±0.143；

其中，所述銀杏葉提取中間體通過如下方法制備：

取銀杏葉，用乙醇溶液加熱回流提取，合并提取液，調(diào)pH值，回收乙醇并濃縮至適量，加水稀釋，調(diào)pH值，濾液經(jīng)大孔吸附樹脂吸附純化處理，洗脫液回收乙醇，制成銀杏葉提取中間體。