[發明專利]一種快速提取及檢測奶酪中酪胺含量的方法

在審

• 申請號: 202110532762.6
• 申請日: 2021-05-17
• 公開（公告）號: CN113030348A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 徐斐;袁敏;陳楚翹;葉泰;曹慧
• 申請（專利權）人: 上海理工大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;C08F220/56;C08F222/38
• 代理公司: 北京迎碩知識產權代理事務所(普通合伙) 11512
• 代理人: 錢揚保;張群峰

1.一種快速提取及檢測奶酪中酪胺含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、取適量奶酪碎于離心管中，加入三氯乙酸-鹽酸溶液，混勻獲得樣品懸濁液；

步驟二、將樣品懸濁液在超聲波水浴中超聲5-10min，離心，取上清液通過0.45μm抽濾膜抽濾，得到濾液；

步驟三、取適量濾液作為供體相溶液，以三氯乙酸為接受相溶液，進行電膜萃取，得到提取液；

步驟四、取適量提取液，加入單胺氧化酶、辣根過氧化物酶和顯色液，反應一段時間，得到待測溶液；

步驟五、對待測溶液測定吸光度值，并根據吸光度值計算酪胺含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟一中向奶酪樣品中加入0.5％-10％三氯乙酸，加入0.1mol/L-1mol/L的鹽酸，混勻，其中三氯乙酸/鹽酸溶液體積比為3:1。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟三中采用的電膜萃取裝置包括：載體室(1)、電源裝置(2)、支撐板(3)和支撐液膜管(5)，載體室(1)中盛放供體相溶液(11)，支撐板(3)設置在載體室(1)中部，支撐板(3)設有兩處通孔，通孔一用于插入正電極(4)，通孔二用于插入支撐液膜管(5)，支撐液膜管(5)下部為支撐液膜(9)，上部盛有接受相溶液(8)，接受相溶液(8)中插入負電極(10)。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，載體室(1)中設有磁力轉子(6)，底部設有磁力攪拌器(7)。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述支撐液膜管(5)采用聚丙烯酰胺凝膠液膜作為支撐液膜。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，負電極(10)固定于支撐液膜(9)上方2～3mm處，正電極(4)插入的位置高度與負電極(10)保持一致。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟三中取20-40mL濾液作為供體相溶液，0.5-1.0mL 10％三氯乙酸作為接收相溶液，萃取電壓為30-60V，萃取時間為5-10min。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟四中顯色液為二甲基苯胺和氨基安替吡啉的混合液。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟五中測定吸光度值為測定550nm處的吸光度值，根據測出的吸光度值，用標準曲線擬合方程計算得到酪胺的濃度。