[發明專利]NGF作為用于治療食管癌的藥物及診斷試劑盒的應用

在審

• 申請號: 202110532519.4
• 申請日: 2021-05-17
• 公開（公告）號: CN113289021A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 王艷東;李慧
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61P35/00;G01N33/573;G01N33/574;C12Q1/6851;C12Q1/6886;C12Q1/02
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

NGF作為用于治療食管癌的藥物及診斷試劑盒的應用屬于生物醫藥領域。本發明利用干擾NGF基因的表達載體，通過大量體外細胞實驗證明干擾NGF基因的表達水平能夠對食管癌細胞的增殖、遷移起到抑制作用。并通過熒光定量PCR和Western Blot實驗表明，NGF基因表達受到干擾后，與細胞惡性增殖相關的蛋白激酶B(AKT)信號通路被抑制，且其下游Cyclin D1即G1/S?特異性周期蛋白?D1以及基質金屬蛋白酶MMP2的基因表達水平受到抑制，進一步從基因和蛋白的分子水平證實了NGF通過激活AKT信號通路能夠對食管癌的發生和發展起促進作用，提示NGF及其調控的下游產物可作為食管癌臨床治療的靶標。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及神經生長因子NGF作為治療食管癌的藥物或診斷試劑盒中的應用。

背景技術

食管癌在全球癌癥死因中排名第六位，每年約有30萬人死于食管癌，流行病學顯示，食管癌的發病率在不同地區和人群間有著很大差異，亞洲地區發病率明顯高于其他國家，并且男性發病率高于女性，且以40歲以上的中老年人為主。我國每年因食管癌病逝的約有15萬人，占全球食管癌死亡率的二分之一，是食管癌的高發地區。食管癌的早期典型癥狀主要表現為吞咽困難，中后期會出現癌癥轉移至神經、肝臟等器官，引起胸骨疼痛等癥狀。目前認為食管的發生與長期嗜好吸煙飲酒、攝入過硬過熱的食物、進食過快有關，但造成食管癌的具體機制還尚未研究清楚。

按照組織類型可將食管癌主要分為食管腺癌(EAC)和食管鱗癌(ESCC)兩種類型。其中EAC在白色人種中發病率較高，而我國食管癌發生的主要組織類型為ESCC。ESCC通過多步過程發展，從正常的鱗狀上皮開始，發展為低度上皮內瘤樣變(LGIN)，高度上皮內瘤樣變(HGIN)，最后發展為浸潤性癌。研究表明，表皮生長因子(EGF)和表皮生長因子受體(EGFR)在ESCC中過表達，并且與不良的預后相關聯。此外，諸如RAS和AKT途徑信號通路都被認為與ESCC的發展有關。

神經生長因子(NGF，nerve growth factor)是神經營養素家族之一，在20世紀40年代由Rita Levi-Montalcini提出，自最初發現以來，就促進了神經生物學的巨大進步。在哺乳動物的胚胎發育過程中，未成熟的神經元競爭供應有限的靶標NGF，從而獲得營養因子支持，以使其存活。此外，NGF起著生存信號的作用，目標衍生的NGF向細胞體發送逆行信號并支持神經元存活，使神經支配神經元的數量和特性與目標組織或器官的需求相匹配。NGF還在軸突末端發出局部信號，以促進突觸發展和靶向神經支配，即使神經元的大小發生變化，也可以確保適當的神經支配。因此，NGF在神經元(包括NGF依賴性初級傳入神經和交感神經節后神經元)的存活和維持中起著關鍵作用。除了促進神經元發育作用外，NGF與其受體酪氨酸激酶TrkA或其他低親和力p75神經營養蛋白受體p75NTR結合調節周圍神經元的表型，如細胞體和樹突大小以及神經遞質的釋放。NGF在影響疼痛機制，神經系統疾病領域內已有了較為成熟的應用和發展。

近年來的一些研究發現，NGF除了在神經系統上的作用外，還與多種癌癥的發生密切相關，如發現在胃癌、胰腺癌、卵巢癌中均發現NGF表達含量升高。在胃癌中，膽堿能刺激胃上皮細胞從而誘導NGF表達，進而促進神經浸潤和癌變。通過抗NGF抗體或TrkA抑制劑阻斷NGF/TrkA信號傳導可降低毒蕈堿型乙酰膽堿誘導的細胞增殖和腫瘤發生，因此可將前饋ACh-NGF軸作為腫瘤治療和預防的靶標。在胰腺癌中，通過金納米簇輔助遞送抗NGF的siRNA，從而抑制了小鼠胰腺腫瘤的進展，證明了靶向NGF能夠作為一種潛在治療胰腺癌的策略。并且目前的臨床樣本中已經發現NGF在食管鱗狀細胞癌中也存在著過量表達，但其對于食管癌的作用機制還尚未研究清楚。