[發明專利]一種輔助改善記憶的天麻發酵產物極性組分及其應用

有效

• 申請號: 202110531153.9
• 申請日: 2021-05-16
• 公開（公告）號: CN113308495B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 梁建東;田維毅;向麗;楊長福;曹峰;劉明;代永東;陳萬浩;任秀秀;馮麗嫻;羅成浩;郭興
• 申請（專利權）人: 貴州中醫藥大學
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;C12N1/14;A61K36/8988;A61P25/28;A23L33/105;C12R1/645
• 代理公司: 貴陽易博皓專利代理事務所(普通合伙) 52116
• 代理人: 張浩宇

本發明公開了一種顯著提高記憶的天麻發酵產物極性組分及其應用，該天麻發酵產物極性組分的制備方法包含種子液培養基制備、活化菌種、種子液制備、靈芝蛹蟲草天麻發酵產物醇提物制備、靈芝蛹蟲草天麻發酵產物正丁醇極性部位制備等步驟。本發明經過研究發現，靈芝蛹蟲草天麻發酵產物醇提物中的正丁醇組分具有可以顯著提高記憶的作用，可以應用于制備治療阿爾茨海默癥的藥物中或者改善記憶的功能呢食品和保健品，為進一步研發療效顯著、改善記憶效果理想的中藥抗阿爾茨海默癥藥物提供了基礎，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種輔助改善記憶的天麻發酵產物極性組分及其應用，屬于藥物技術領域。

背景技術

以記憶下降為主的認知障礙是一種常見的神經系統性疾病，包括阿爾茨海默病(AD)(老年癡呆最常見的類型)、帕金森病(PD)、多發性硬化癥(MS)等，而AD是其最嚴重的表現形式。全世界患有老年癡呆人數4680萬，而在60歲以上的老年人中，大約有5-7％的人會受到癡呆的影響，65歲以后，發病率大約隔5年翻一倍。因此，探究治療認知障礙患者的有效藥物，具有遠大社會經濟意義。學習記憶障礙是癡呆的一個典型癥狀，記憶力的喪失嚴重影響著癡呆患者的生活質量。迄今為止，批準治療認知障礙的藥物僅有兩類，一是膽堿酶抑制劑，如他克林、多奈哌齊、利凡斯的明、加蘭他敏；二是N-甲基D-天冬氨酸拮抗劑，如美金剛。盡管這些藥物在一定程度上能夠改善或減輕認知障礙和精神癥狀，但這兩類藥物中藥效的藥物非常少，且這兩類藥副作用較大，價格高昂。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種輔助改善記憶的天麻發酵產物極性組分及其應用，為阿爾茨海默癥及記憶障礙藥物和改善記憶的功能食品、保健品提供新選擇。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：

一種輔助改善記憶的天麻發酵產物極性組分，該天麻發酵產物極性組分的制備方法包含以下步驟：

(1)種子液培養基制備：取土豆20g，洗凈去皮切成小塊放入鍋中，加水100mL，煮沸10-15分鐘，過濾，濾液加入葡萄糖2g，加熱攪拌均勻，冷卻后，pH自然，121℃滅菌30min，備用；

(2)活化菌種：將蛹蟲草菌種B1528、靈芝菌種B1.4分別轉接于PDA平板上，25℃黑暗條件下培養7d，備用；所述的靈芝菌種B1.4在中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號：CCTCCNO：M2019790，蛹蟲草菌種B1528在中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號：CCTCCNO：M2019789；

(3)種子液制備：無菌條件下，用打孔器從步驟(2)項的平板中打取直徑5mm的活化靈芝菌種B1.4和蛹蟲草菌種B1528，接入裝有100mL種子液培養基中，于200r/min、25℃的搖床培養箱中，黑暗條件下震蕩培養7d，備用；

(4)靈芝蛹蟲草天麻發酵產物醇提物制備：添加蔗糖為碳源18.2g/L，蛋白胨為氮源30.0g/L，磷酸二氫鉀為無機鹽0.9g/L，蛹蟲草-靈芝接種比例為1:2，天麻添加量為30.0g/L，培養溫度25℃，搖床200r/min轉速，黑暗培養15d，獲得發酵產物；將獲得的發酵產物1000r/min離心，得到發酵液和固形物；固形物冷凍干燥后打粉，加入10倍量體積95％乙醇，室溫下浸提三次，每次浸提時間24h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得靈芝蛹蟲草天麻發酵產物醇提物浸膏；

(5)靈芝蛹蟲草天麻發酵產物正丁醇極性部位制備：取步驟(4)項靈芝蛹蟲草天麻發酵產物醇提物浸膏，加入溫水均勻混合為懸浮液，移入分液漏斗中，再按1:1的比例加入石油醚，輕輕晃動分液漏斗，使石油醚和發酵產物醇提物充分混勻后置于漏斗架上，讓其靜置分層；分層完畢后，上層近似透明油狀的液體即為石油醚萃取部位，下層即為被石油醚萃取后剩下的部位，分別收集上、下層部位至燒杯中；后將萃取剩下的下層部位轉移至分液漏斗中，按上述方法分別加入同等比例的乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，每個溶劑均萃取6次，每次0.5h，最后萃取剩下的為水部分；將經正丁醇萃取所得的溶液減壓濃縮至無味，得到靈芝蛹蟲草天麻發酵產物正丁醇極性部位的浸膏。