[發明專利]一種王老吉涼茶濃縮汁UPLC指紋圖譜的建立方法及其檢測方法

有效

• 申請號: 202110529640.1
• 申請日: 2021-05-14
• 公開（公告）號: CN113295789B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 張豐源;葉文才;徐文流;翁少全;王英;鄭榮波;范春林;李詞周;熊煜;楊方明;王艷芳
• 申請（專利權）人: 廣州王老吉大健康產業有限公司;王老吉大健康產業（梅州）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 凌日紅

本發明屬于涼茶植物飲料質量控制技術領域，具體涉及一種王老吉涼茶濃縮汁UPLC指紋圖譜的建立方法及其檢測方法。本發明提供的建立方法包括以下過程：(1)對照品溶液的制備；(2)供試品溶液的制備；(3)超高效液相色譜法測定條件的建立及測定，可以檢測到14個特征共有峰。本發明的建立方法操作簡便、分析時間短、專屬性強，具有良好的精密度、穩定性和重現性，能快速全面地檢測王老吉涼茶濃縮汁中的主要化學成分，反映王老吉涼茶濃縮汁的質量信息等優點，為王老吉涼茶的生產及質量控制提供科學參考。

技術領域

本發明屬于涼茶植物飲料質量控制技術領域，具體涉及一種王老吉涼茶濃縮 汁UPLC指紋圖譜的建立方法及其檢測方法。

背景技術

涼茶是嶺南地區人民在長期疾病預防與養生的探索過程中，以中醫理論為指 導，結合當地氣候條件和水土特征，靈活運用藥性寒涼或有消解內熱功效的中草 藥，總結出的一種具有清熱解毒、生津止渴、祛火除濕等功效，可作為日常生活 的茶飲料，而涼茶作為嶺南地區的一種文化，已得到國家認可，在2006年被列 入第一批國家級“非物質文化遺產”。時至今日在廣東大街小巷仍可見現制現賣的 涼茶鋪，而近年來開發出的罐裝、紙盒裝的涼茶，也成功的將涼茶文化推向了全 國乃至世界。

“王老吉”涼茶以傳統配方“三花三草一葉”(菊花、金銀花、雞蛋花、涼粉草、 甘草、夏枯草和布渣葉)為基礎，在藥材的提取、藥液濃縮比例、白砂糖用量以 及滅菌和罐裝工藝上不斷改進，優化其風味，使得王老吉涼茶成為深受消費者喜 愛，具有高知名度的植物涼茶類飲料。王老吉涼茶濃縮汁是王老吉涼茶的中間品， 為七味配方藥材提取濃縮所得。

王老吉涼茶屬于植物飲料類飲品，其配方藥材較多，提取液濃縮汁化學成分 復雜，而目前已報道的化學成分僅17個，包括7個酚酸類化合物，6個黃酮類 化合物，4個三萜及皂苷類化合物(賀穎穎等.中藥材,2018,41(4):889-893.)，其 化學成分的研究尚不完全。目前王老吉涼茶的質量控制僅依據《中華人民共和國 國家標準(植物飲料類)》規定的植物飲料類產品的感官檢測和總膳食纖維含量的 測定。已公布的專利(廣州王老吉藥業股份有限公司.王老吉涼茶中間品揮發性 成分指紋圖譜的構建及檢測方法[P].CN106324143 A,2017.01.11)對王老吉涼茶 中間品(濃縮汁)揮發性成分指紋圖譜及檢測方法進行構建，該方法只針對揮發 性成分，而王老吉濃縮汁是通過水提取得到的，主要是水溶性成分，其中揮發性 成分含量極少，用來控制王老吉濃縮汁的質量，具有很強的局限性。

發明內容

本發明通過多種分離手段，對王老吉涼茶濃縮汁的主要成分進行分離純化以 及結構鑒定，并采用UPLC技術，建立了一個能夠快速全面反映王老吉涼茶濃縮 汁內在質量(化學成分)的指紋圖譜及檢測方法，為王老吉涼茶的生產及質量控 制提供有效方法。

為了達到上述目的，本發明采用的具體方案為：

一種王老吉涼茶濃縮汁UPLC指紋圖譜的建立方法，包含如下步驟：

S1、對照品溶液的配制：分別精密稱取對照品丹參素、原兒茶酸、新綠原酸、 15-去甲基雞蛋花苷、綠原酸、裂環馬錢苷、咖啡酸、海芒果酸B、mesonolic acid D、異迷迭香酸苷、異綠原酸B、異綠原酸C、迷迭香酸和異綠原酸A，加入30～50％ 甲醇溶解，配制成0.03～0.06mg/mL的溶液，0.22μm微孔濾膜過濾，取續濾液， 即得；

S2、供試品溶液的配制：取王老吉涼茶濃縮汁10～20mL，5000r/min離心15min， 取離心后上清液5-10mL，加入15～30mL甲醇稀釋沉淀，以5000r/min再次離心， 上清液經0.22μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得；

S3、高效液相色譜法測定：分別精密吸取步驟S1制得的對照品溶液和步驟 S2制得的供試品溶液，注入超高效液相色譜儀測定，得到具有共有特征峰的王 老吉涼茶濃縮汁指紋圖譜。